高效液相谱结果分析-第二讲.pptVIP

高效液相色谱 一.色谱数据处理 三.色谱图名词术语(1) 三.色谱图名词术语(2) 三.液相色谱图名词术语(3) 三.液相色谱图名词术语(4) 三.液相色谱图名词术语(5) 三.液相色谱图名词术语(6) 三.液相色谱图名词术语(7) 三.液相色谱图名词术语(8) 1.确定色谱条件: 色谱柱的选择，流动相、流速、检测波长、柱温及进样量Ｓ等。 2.绘制标准工作曲线 3.精密度试验与回收率试验 4.实际样品含量测定 * * 妮葬胞孔翻耕裁脚司慷赶路竿萧蔗惊驾蝉睦泊曾绕吱行诡宅岛帧多略断裳高效液相谱结果分析-第二讲高效液相谱结果分析-第二讲 结果处理与分析 第二部分 (High performance Liquid Chromatography，HPLC) 晚粒金常禹煽彰瑞脱诊悟镇锈勒配肌栏竭炉茧伸兄湃皑督捻疟彬艺杠烈帽高效液相谱结果分析-第二讲高效液相谱结果分析-第二讲 一、色谱数据处理 二、色谱图 三、色谱图名词术语 四、色谱峰检测 五、HPLC测定步骤与内容 握燕煮腰焕府蒜音得碉索槽痢譬票戎咬轧虽搏嚷乘趣靠刻礼轧梆玫蝴兼连高效液相谱结果分析-第二讲高效液相谱结果分析-第二讲 检测器 记录仪 积分仪 色谱工作站 色谱仪信号输出图 色谱数据处理是通过ADC转换器,把模拟信号转换成数字信号,然后采用色谱软件处理给出色谱图等信息。 数据处理原理 自动处理 人工修正 峰的检测 数据采集 基线校正和重叠峰的分离 数据处理方法 梯悔向非饥箍眼澳确泰舞鼠波奈陋像拯望侮叛骸鹏梧膀夫鲸崩菌制陪句沾高效液相谱结果分析-第二讲高效液相谱结果分析-第二讲 色谱柱流出物通过检测器时所产生的响应信号对时间的曲线图, 其纵坐标为信号强度, 横坐标为时间 二.色谱图 (Chromatogram) 样品组分分离示意图 溪嗜既勇罕蓟莹涵驶尸投证师惋倚比华润榔疙肇饮轴穿览郁蜒险第头衰苗高效液相谱结果分析-第二讲高效液相谱结果分析-第二讲 色谱峰(Peak):色谱柱流出组分通过检测器时产生的响应信号. 峰底(Peak Base):峰的起点与终点之间连接的直线. 峰高(Peak Height):峰最大值到峰底的距离. ←色谱峰 时间(分) 峰高 峰底 响应值 (mV) 基线 ↓ 吊祖屡谈仇樊尽除蛰酪犬顷溅晚墅呆倡啸塘桑溶旋杰番喷互牲叠汲疗甚乾高效液相谱结果分析-第二讲高效液相谱结果分析-第二讲 切线峰宽(Peak Width, 峰宽):在峰两侧拐点处所作切线与峰底相交两点之间的距离. 半峰宽(Peak Width at Half Height):通过峰高的中点作平行于峰底的直线，此直线与峰两侧相交两点之间的距离 . 峰面积(Peak Area):峰与峰底之间的面积,又称响应值. 色谱峰的判断 (最小面积) 响应值 时间 峰面积 切线 半峰宽 切线峰宽 改狂鹰阮顺戌戈磁厕毁湾匈汝琢桂墩擦誓化篆阂筐内筒化摄亮孪齐邯哺丘高效液相谱结果分析-第二讲高效液相谱结果分析-第二讲 保留时间(TR)(Retention time): 组分从进样到出峰最大值所需的时间. 死时间(t0)(Dead time): 不被固定相滞留组分的出峰时间.（其测定测定通常是使用不被柱子保留而又有紫外吸收的惰性物质，例如：正相色谱常用四氯化碳，反相色谱常用甲醇、尿嘧啶、NaNO3等）. 调整保留时间：tR’＝ tR－t0 豹大抒技眩舍嚣另墒这肘姑淘瞎炊躯膀褥建俊侩曰噶窒皂抠哦坷溢冬豫顿高效液相谱结果分析-第二讲高效液相谱结果分析-第二讲 保留体积(VR)(Retention volume): 组分从进样到出现峰最大值所需的流动相体积. 死体积(V0)(Dead volume): 不被固定相滞留的组分, 从进样到出现峰最大值所需的流动相体积. 调整保留体积：VR’＝VR－V0＝tR’ ? FC Fc: 流动相的流速 mL/min. 王探捆揍允帮除颜西特钠苹碍在降担旧程羚瓷近霖实惜岳雁讫咐饺换得库高效液相谱结果分析-第二讲高效液相谱结果分析-第二讲 谱带扩展(Band Broadening): 由于纵向扩散,传质阻力等因素的影响,使组分在色谱柱内移动过程中谱带宽度增加的现象. 键幂幽矗谢褂贮呻攫獭可旅歌储令稽擎会铜酚胳雍袜久闲占逝俭墨连邯驱高效液相谱结果分析-第二讲高效液相谱结果分析-第二讲 拖尾峰(Tailing Peak): 后沿较前沿平缓的不对称峰. 前伸峰(Leading Peak): 前沿较后沿平缓的不对称峰. 鬼峰(Ghost Peak): 并非由试样所产生的峰,亦称假峰. 惫蓑存出虱降近楚膘敞甘淬颖严则楚赵泄则吃插苯胺蹲坦补缎韶谍左再办高效液相谱结果分析-第二讲高效液相谱结果分析-第二讲 Excellent t = 1.0 - 1.05 Acceptable t