植物体内硝态氮含量的测定讲解.pptVIP

植物体内硝态氮含量的测定 实验目的与意义? 植物体内硝态氮含量可以反映土壤氮素供应情况，常作为施肥指标。另外，蔬菜类作物特别是叶菜和根菜中常含有大量硝酸盐，在烹调和腌制过程中可转化为亚硝酸盐而危害健康。因此，硝酸盐含量又成为蔬菜及其加工品的重要品质指标。测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养状况, 而且对鉴定蔬菜及其加工品质也有重要意义。 原理 在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸。生成的硝基水杨酸在碱性条件下（pH12）呈黄色，最大吸收峰的波长为410 nm，在一定范围内，其颜色的深浅与含量呈正比，可直接比色测定。 材料、仪器与试剂 ?植物材料：菠菜 ?仪器：分光光度计；天平（感量0.1 mg）；试管；刻度吸量管0.1 ml、0.5 ml、5 ml、10 ml各1支；50 ml容量瓶；小漏斗（?5cm）3个；玻棒；洗耳球；水浴锅；封口膜；7 cm 定量滤纸若干； ? 。 试剂：  500 mg/L 硝态氮标准溶液： 精确称取烘至恒重的KNO3 0.7221 g 溶于蒸馏水中，定容至200 ml 5%水杨酸-硫酸溶液： 称取5 g 水盐酸溶于100 ml 比重为1.84 的浓硫酸中，搅拌溶解后，贮于棕色瓶中，置冰箱保存一周有效。8%氢氧化钠溶液：80 g 溶于1 L蒸馏水中即可。 实验步骤? 1.?标准曲线的制作（1）吸取500 mg/L 硝态氮的标准溶液1 ml、2 ml、4 ml、6 ml、8 ml、10 ml分别放入50 ml 容量瓶中，用无离子水定容至刻度，使之成10、20、40、60、80、100mg/L的系列标准溶液。 (2)吸取上述系列标准溶液0.1 ml，分别放入烘干的试管中，以0.1 ml 蒸馏水代替标准溶液作空白。再分别放入0.4 ml 5%水杨酸-硫酸溶液，摇匀，在室温下放置20 min后，再加入8% NaOH?溶液9.5 ml，摇匀冷却至室温。则显色液总体积为10 ml。 (3)绘制标准曲线：以空白作参比，在410 nm 波长下测定吸光度。以吸光度为横坐标，硝态氮浓度为纵坐标，绘制标准曲线并计算出回归方程。  2.样品中硝酸盐的测定 (1)样品液的制备： 取一定量的植物材料，剪碎混匀，用天平精确称取材料2 g 左右，放入试管中，加入10 ml 去离子水，用塑料封口，置于沸水浴中提取30 min。到时间后取出，用自来水冷却，将提取液过滤到25 ml容量瓶中，并反复冲洗残渣，最后定容至刻度。 (2)样品液的测定： 吸取样品液0.1 ml放入烘干的试管中，然后加入5%水杨酸-硫酸溶液0.4 ml，混匀后置室温下20 min，再慢慢加入9.5 ml 8% NaOH溶液，待冷却至室温后，以空白作参比，在410 nm 波长下测其吸光度。 在标准曲线上查得或用回归方程计算出硝态氮的浓度，再用以下公式计算其含量。??? ???? NO3- -N含量= (C× )/W 式中 C—标准曲线上查得或回归方程计算得NO3- —N浓度； V—提取样品液总量； W—样品鲜重。 注意事项： 1、一定不要将5%水杨酸-硫酸溶液溅到桌面、试管外或衣物及皮肤上。 2、加热煮沸时要小心，以免烫伤。 * V 1000 *