1仪器分析概论全解.ppt

展开 画出溶剂前沿（做标记） 计算Rf值 样本甲： Rf=3.0/5.8 =0.517 样本乙： Rf=4.3/5.8 =0.741 苏丹红快速检测试剂盒 example 2002年研究人员发现“苏丹1号”色素能造成人类肝脏细胞的DNA突变，可能致癌的特性。薄层色谱可用于苏丹红（1、2、3、4号）等非食用色素的快速检测 色素提取柱 薄层层析结果 层析结果判断示意图 * 常用仪器分析方法概论 第二章 教学基本要求 了解仪器分析方法的特点及发展状况，掌握紫外及可见分光光度计仪器的基本结构； 掌握紫外及可见分光光度法的原理，朗伯-比尔定律； 了解色谱分析法的分类、基本概念、色谱分析的基本原理； 了解气相色谱法、薄层色谱法和高效液相色谱法及其应用。 第一节 仪器分析简介 仪器分析法是通过测定物质的光、电、热、磁等物理化学性质来确定其化学组成、含量和化学结构的分析方法。 常量分析、半微量和微量分析 计算机与分析仪器的结合，出现了分析仪器的智能化，加快了数据处理的速度。它使许多以往难以完成的任务，如实验室的自动化，图谱的快速检索，复杂的数学统计可轻而易举地完成。信息时代的到来，给仪器分析带来了新的发展。信息科学主要是信息的采集和处理。信息的采集和变换主要依赖于各类的传感器。这又带动仪器分析中传感器的发展，出现了光导纤维的化学传感器和各种生物传感器。 发展中的仪器分析 联用分析技术已成为当前仪器分析的重要发展方向。将几种方法结合，特别是分离方法（如色谱法）和检测方法（红外光谱法、质谱法、核磁共振波谱法、原子吸收光谱法等）的结合。 1.气相色谱—质谱法（GC—MS） 2.气相色谱—质谱法—质谱法（GC—MS—MS） 3.气相色谱—原子发射光谱法（GC—AED） 4.液相色谱—质谱法（LC—MS） 发展中的仪器分析 第二节 紫外-可见分光光度法 Ultraviolet and visible Spectrophotometry 光度分析基本原理 光学分析法 光谱法 非光谱法：旋光法、折射法 作用物：分子光谱、原子光谱 波长：X-射线光谱、紫外、红外光谱等。 转换方向：吸收光谱、发射光谱 X光电子能谱 真空紫外光谱 紫外-可见（吸收、发射）光谱及荧光光谱 红外光谱 微波波谱 核磁共振光谱 光谱类型 X射线 远紫外 近紫外 可见光 近红外 红外 远红外 微波 无线电波 辐射类型 0.1~10nm 10~200nm 200~400nm 400~760nm 0.76~2.5μm 2.5~50μm 50~1000μm 0.001~1m 1~1000m 波长范围 吸收光谱示意图 1-吸收峰；2-谷；3-肩峰；4-末端吸收 4 2 2 1 3 1 λ A λmax λsh λmin 定性依据 A455/A340 ≥ 1.5 A455/A483 = 1.14~1.18 b-胡萝卜素的紫外吸收光谱 I0 It Ir Ia 透光度 （transmittance) T=It/I0 吸光度 (absorbance) A= -lgT 朗伯-比尔定律 影响物质对光吸收程度的因素： 物质的本性 入射光波长 溶剂种类 溶液温度 溶液浓度 光路长度 A= kbc b：液层厚度，即吸收池厚度，单位 cm c：溶液浓度当单位为g/100ml时，k为百分吸光系数，用E1%1cm表示 Lambert-Beer定律 紫外-可见分光光度计 光源?单色器?样品吸收池 ? 检测器 ? 指示器 1、光源(light source) 要求发射强度足够、稳定，具有连续光谱的光源 热光源(如钨丝灯及碘钨灯)：350nm，可见光区 气体放电光源(如氢灯或氘灯) ：150~400nm，紫外区 2、单色器(monochromator) 将来自光源的连续光谱按波长顺序色散，并从中分离出一定宽度的谱带。 色散元件： 三角棱镜和光栅 3、吸收池(absorption cell，比色皿) 吸收池：有普通玻璃和石英玻璃 4、检测器(detector) 将所接收的光信息转变为电信息，有硒光电池、光电倍增管、光二极管阵列检测器等。 5、指示器(indicator) 有光点检流计、微电流计、数字显示器等 单光束分光光度计 双光束分光光度计 双波长分光光度计 类型 755s分光光度计 （上海产，有氘灯，可测量紫外区吸收） 紫外-可见分光光度计 （美国热电公司） 注意：选择适当的参比溶液 内含溶剂、显色剂以及其他进行显色反应必要的试剂 测定吸光度值并归零 Akta explorer高压层析系统－紫外在线检测 第三节 色谱分析(Chromatography) 固