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(分子生物学复习资料
填空: 大肠杆菌DNA相对分子质量仅为2.4×109,或4.6×106bp,其完全伸展总长为1.3mm,含4000多个基因。具有2×10^4个负超螺旋,其连接差(超螺旋密度)为λ= -2×10^4/4.2×10^5= -0.05 DNA分子的比联系差即超螺旋密度。真核生物基因组较大,原核生物基因组较小。 由DNA和组蛋白组成的染色质纤维细丝是许多核小体连成的念珠状结构。染色质是一些核蛋白的复合物,又组蛋白(与DNA组成核小体)及非组蛋白成分组成;核小体是染色质的结构单位,由约200bp的DNA和八聚体(2H2A,2H2B,2H3,2H4)组蛋白+H1构成。 单个密码子的氨基酸(甲硫氨酸)、(色氨酸)。 真核生物RNA的对应三种聚合酶:聚合酶Ⅰ在核仁内转录5 S rRNA除外的所有rRNAs,RNA聚合酶Ⅱ转录mRNA基因及几乎所有参与RNA加工的snRNAs,RNA聚合酶Ⅲ转录5S rRNAs和所有tRNAS及其他聚合酶Ⅰ和Ⅱ不转录的RNAs。 大C和小c。C值往往与种系进化的复杂程度不一致,某些低等生物却具有较大的C值,成为C值谬误(C值悖论)。C值通常指一种生物单倍体基因组DNA的总量,即某生物单倍体基因组DNA核苷酸数;c值指受中心法则限定,编码结构基因DNA的核苷酸数。 mRNA前体内含子的5’边界序列为GU,3’边界序列为AG。 判断: 密码子具有通用性。 完整的信号肽是保证蛋白质运转的必要条件,仅有信号肽还不足以保证蛋白质运转的发生,信号肽的切除并不是运转所必需的,并非所有的运转蛋白质都有可降解的信号肽。 原核生物中一种RNA聚合酶的合成几乎负责所有mRNA、rRNA和tRNA的转录。E.coli的RNA聚合酶由核心酶和σ亚基组成,核心酶是基本的转录装置,σ因子能够指导核心酶(α、β、β’、 ω)转录特异的基因(控制启动子的识别)。 原核细胞中,大亚基的沉降速率是50svedberg,所以称50S亚基,而小亚基称为30S亚基,真核细胞的核糖体大一些,有60S和40S两个亚基组成80S的核糖体。 大肠杆菌RNA聚合酶首先由两个α亚基、一个β亚基、一个β’亚基和一个ω亚基组成核心酶,加上一个σ亚基后则成为聚合酶全酶。 引发酶是dnaG基因的产物,是在特定环境下发挥作用的RNA聚合酶,仅用于合成DNA复制所需的一小段RNA。 信号肽的特点:⑴整体上是一段疏水的肽段; ⑵信号肽一般位于N端,进入ER膜后被信号肽酶水解; ⑶信号肽的中部常常由10-15个残基构成疏水性核,前端常常有几个带正电荷的碱性氨基酸,后端为为含丙氨酸的区域; ⑷信号肽酶的水解位点通常是“Ala-X-Ala”; ⑸信号肽可以位于蛋白质分子的各个部位; ⑹普遍适用性。真核细胞合成的蛋白质N端信号肽能形成两个α螺旋的发夹结构,这个结构可插入到内质网的膜中,将正在合成中的多肽链带到内质网内腔。 真核生物转录翻译空间变化:细胞核→细胞质。 tRNA转录后加工涉及的酶:tRNA核酸内切酶、RNA连接酶、tRNA核苷酸转移酶、tRNA甲基化酶。 10、真核生物mRNA两端最末端基团:5’甲基化鸟嘌呤或者甲基化腺嘌呤,3’腺嘌呤 11、转录方向:5’ →3’ 选择题: DNA中的碱基(ATCG),RNA中的碱基(AUCG)。 氨基酸必须在氨酰-tRNA合成酶的作用下生成活化氨基酸——AA-tRNA。 DNA指纹指具有完全个体特异的,其个体识别能力足以与手指指纹相媲美,因而得名。可用来进行及亲子鉴定,同人体核DNA的酶切片段杂交,获得了由多个位点上的组成的长度不等的杂交带图纹,这种图纹极少有两个人完全相同,故称为DNA 。’无帽子结构,3’没有或只有较短的多(A)结构,可能以多顺反子的形式存在,并且其半衰期短,几乎所有的原核生物mRNA都可以被分为三个部分:编码区和位于AUG之前的5’端上游非编码区以及终止密码子之后不翻译的3’端下游非编码区; 真核生物的mRNA5’存在帽子结构,绝大多数真核生物mRNA具有多(A)尾巴,真核生物mRNA几乎都是单顺反子,只包含一个蛋白信息。 环状DNA有哪些复制方式? 环状DNA双链复制可分为θ型、滚环形和D环形几种类型。 θ型:它富含AT,并含有多个短的重复序列,能被复制起始点结合蛋白所识别。 滚环形:是单向渎职的一种特殊方式,在噬菌体中很常见。 D环形:也是单向复制的一种特殊方式,这种方式首先在动物线粒体DNA的复制中被发现。 聚合酶中的σ因子? σ因子作用是负责模板链的选择和转录的起始,它是酶的结构效应物,使酶专一性识别模板上的启动子。σ因子可以极大地提高RNA聚合酶对启动子区DNA序列的亲和力,酶底结合常熟提高103倍,酶底复合物的半衰期可达数小时至数十小时。σ因子还能使RNA聚合酶与模板DNA上非特异性位点的结合常数降低10
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