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转基因作物叶片蛋白浓度测定试剂盒托普云农转基因作物叶片蛋白浓度测定试剂盒是用特异性抗 Cry2A 单抗包被的微孔板和酶标记抗 Cry2A 单抗，双抗体夹心法检测 Cry2A 基因表达产物，可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的 Bt-Cry2A 蛋白。一、转基因作物叶片蛋白浓度测定试剂盒简介概述：转基因食品的安全问题成为社会争议的热点议题之一，转基因食品流通到人们生产生活领域、其安全性、风险性值得商榷。有关人士“转基因大豆油与肿瘤高度相关”的言论，引发热烈争论：转基因食品到底能不能吃？近期看来，这是一个无解的问题。美国人食用的80%包装食品的原料都是转基因作物，但至今未见明显、直接的“有害”证据；但也有人认为，声称“转基因食品安全”的国际机构，“不愿说出真相”。转基因技术是将人工分离和修饰过的基因导入到生物体基因组中，由于导入基因的表达，引起生物体的性状的可遗传的修饰。我们现在说的Bt转基因，事实上就是cry转基因。1981年，科学家提纯了BT蛋白质并命名为cry，随后克隆出cry的基因。Cry对部分昆虫具有毒性，BT转基因主要用于提高作物的抗虫性。BT蛋白在人体中能够蓄积，其长期毒性不能低估。BT蛋白可以与哺乳动物的肠粘膜细胞发生结合，在高浓度的时候，可能会对哺乳动物造成毒性。BT蛋白具有抑制机体的免疫功能和造血功能，引起自身免疫性疾病等潜在危险。 因此，从安全角度出发对于转基因作物与食品开展检测，具有重要意义。浙江托普云农科技股份有限公司在国内率先开发出转基因作物叶片蛋白浓度测定Cry2A 试剂盒，应用双抗体夹心免疫层析的原理，在涌动过程中，样本中的抗原在先胶体金标记的抗体A结合，继而与检测线上特异性单克隆抗体B的结合形成双抗体夹心复合物。如果样本中抗原含量大于限量，检测线显红色，结果为阳性；反之，检测线不显色，结果为阴性。托普云农转基因作物叶片蛋白浓度测定试剂盒适用于叶组织及玉米、棉花等作物的种子的检测。叶、苗、种子样品的检测必须磨碎后用缓冲液或水稀释。为了获得最佳的结果，不同的样品应用不同比例的水进行稀释，可广泛应用于政府机构监测、食品加工企业检测和普通家庭检测分析。二、转基因作物叶片蛋白浓度测定试剂盒原理：托普云农转基因作物叶片蛋白浓度测定试剂盒用特异性抗 Cry2A 单抗包被的微孔板和酶标记抗 Cry2A 单抗，双抗体夹心法检测 Cry2A 基因表达产物，可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的 Bt-Cry2A 蛋白。三、转基因作物叶片蛋白浓度测定试剂盒试剂盒组份（规格）；预包被板（抗 Cry2A 单抗） 12 孔×8Cry2A 酶标抗体 12 ml×1 瓶20×浓缩洗涤液 30 ml×1 瓶5×抽提液/稀释缓冲液 30 ml×1 瓶底物液 A 7 ml×1 瓶底物液 B 7 ml×1 瓶终止液 7 ml×1 瓶使用说明书 1 份0ppb 阴性对照 1ml3 个不同浓度的标样：1 ppb， 5 ppb，10 ppb 各 1ml四、转基因作物叶片蛋白浓度测定试剂盒的试剂准备：托普云农转基因作物叶片蛋白浓度测定试剂盒试剂盒中的 20×浓缩洗涤液 30 ml 加 570 ml 灭菌 ddH2O 溶解稀释至 1×洗涤液，5×抽提液（30 ml）加 120 ml ddH2O 稀释至 1×抽提液，4 ℃存放备用。五、转基因作物叶片蛋白浓度测定试剂盒的样品准备：托普云农转基因作物叶片蛋白浓度测定试剂盒试剂盒称取约 20 mg 叶片，加 0.5 ml 1×抽提液（使用前 30 min 放置室温）研磨至匀浆，室温放置 30 min，测定前把样品上清液稀释 5-20 倍。测定茎干和胚乳中的 Bt 蛋白时，样品称取约 40 mg，加 1ml 1×抽提液研磨。六、转基因作物叶片蛋白浓度测定试剂盒的ELISA反应：1. 依次加 100 μl 阴性对照，标准品（3 个不同浓度的标样： 1 ppb， 5 ppb，10ppb）和待测样品至 96 孔板；2. 用封口膜盖住 96 孔板，快速摇动平板混匀样品；3. 37 ℃恒温箱孵育 30 min；4. 倒掉 96 孔板中液体，用 1×洗涤液每孔 250 μl 洗涤微孔板，漂洗 5 次，用吸水纸拍干；5. 按顺序在每个小孔中加入 100 μl Cry2A-酶标抗体，然后重复步骤 2；6. 37 ℃恒温箱孵育