（新）实验1总黄酮.docVIP

超声波-回流法银杏叶中总黄酮提取的研究 摘要：对超声波和回流法两种不同提取银杏叶中总黄酮方法进行了探讨,研究超声浸提时间、乙醇浓度、料液比对银杏叶总黄酮浸提的影响，并对试验结果进行验证．测定了银杏叶中总黄酮的含量。实验结果表明,超声波提取方法较回流法提取率高。超声波提取总黄酮的最佳操作条件是用80%乙醇浸提,时间50min,料液比1：10。 关键词：银杏叶;黄酮;超声波；回流 前言：银杏叶是银杏的叶片,含有黄酮类活性物质。根据文献记载,银杏叶提取物在医药、保健品、化妆品等领域已得到广泛的应用。其所含有的黄酮类物质,可防止高血压及动脉硬化,活血化瘀,抗肝脏毒,抗炎,祛痰,解热,提高机体免疫功能,抗菌,抗病毒,缓解高血压患者的头痛等多种药理作用。它的提取主要以回流法为主,操作简便,但费时。本文采用超声波提取方法并与传统的回流提取方法比较;同时对超声波提取方法的各项影响因素进行了研究。结果表明,超声波提取法不但提取率高且节省时间。 1实验部分 1.1实验目的 1.1.1探讨超声波和回流法提取银杏叶中的总黄酮提取率的高低。 1.1.2采用单因素实验探究超声浸提时间、乙醇浓度、料液比对银杏叶总黄酮含量的影响。 1.2实验原理 银杏叶为银杏的干燥叶，我国的银杏资源占世界70%以上。银杏黄酮是银杏叶中主要活性成分之一，是开发医药、保健食品和绿色化学品的重要资源。另外银杏叶还含有39种营养及功能成分，包括蛋白质、糖、维生素C、维生素E、胡罗卜素、18种氨基酸、25种矿物质营养微量元素，其中钙、磷、硼、硒含量较高，其他如人体所需的铁、氟、铜、锰、锌、铬等含量也较丰富，其中维生素C、维生素E、胡罗卜素、硒、锌、钙等作为营养性抗氧化剂与非营养性抗氧化剂—银杏黄酮、萜内酯、儿茶素、多酚类等对保护机体不受自由基所致的氧化和损伤发挥着重要的作用。因此，将银杏叶作为高营养、保健功能价值的资源加以开发利用，这对于提高银杏叶综合利用率有重要意义。通常银杏中黄酮类化合物的提取方法有丙酮法、乙醇法、色谱法、酶法等，其中酮醇提取法是相当经典的方法，用醇、酮作提取剂再结合超声波和微波法是近年来广泛采用的方法，由此本文对两种方法的工艺条件和提取率进行了对比研究。 国内外对银杏(叶、果、外种皮等)的有效成分研究表明，有黄酮类、二萜内酯、酚(酸) 类、甾体化合物、生物碱、有机酸类等70余种化合物。前两类为主要活性成分。黄酮类主要来源于叶片，含量约为2.5-5.9％，已鉴定出的黄酮类化合物达44种，其中双黄酮6种，黄酮苷元7种，黄酮苷20种，还有儿茶素，黄酮苷等。大量的黄酮苷为山奈酚、槲皮素和异鼠李素的单、双、叁糖苷，如山奈酚-3-O-glu，槲皮素-3-O-glu，异鼠李素-3-O-glu，及三种苷元在３位与芸香糖形成的苷，它们是银杏黄酮类有效成分的主体物质。 银杏叶中双黄酮类包括银杏双黄酮、去甲银杏双黄酮、异银杏双黄酮、金银松双黄酮等。双黄酮、银杏酚酸类能与其它化合物形成复合物或有致敏作用需除去。银杏(苦)内酯类是苦味成分，属二萜内酯，主要有银杏内酯Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｊ、Ｍ五种，为银杏的重要有效成分，至今尚未发现其存在于其它任何植物中，其中Ｍ仅存在于银杏皮中。另有一倍半萜内酯为白果内酯。 银杏叶黄酮类物质用稀乙醇溶解提取，转溶于稀乙醇中，经碱性稀醇稀释后可与硝酸铝络合成黄色络合物。在亚硝酸钠存在下，该络合物含量(颜色深浅)与其在波长为500nm时吸光度成正比。与标准芦丁相比较，可求得银杏叶中黄酮含量。 1.3材料与仪器 1.3.1仪器：超声波清洗器，索氏提取器，蒸馏装置，烧杯，容量瓶，移液管，具塞刻度试管，水浴锅，电子天平，分光光度计 1.3.2样品与试剂：银杏叶，滤纸，70％乙醇，30％乙醇，5％NaN10%A1(NO3)3，可见分光光度计，4％NaOH (蒸馏水作空白)。以吸光度为纵坐标,浓度为横标,绘出标准曲线图 管号 0.1mg/ml芦丁标准液（ml） NaNO2 （ml） A1(NO3)3 （ml） NaOH （ml） 芦丁含量（mg） 0 0.0 0.3 0.3 4 0.0 1 1.0 0.3 0.3 4 0.1 2 2.0 0.3 0.3 4 0.2 3 3.0 0.3 0.3 4 0.3 4 4.0 0.3 0.3 4 0.4 5 5.0 0.3 0.3 4 0.5 1.4.4总黄酮提取率计算 总黄酮提取率=提取液中黄酮含量/银杏叶粉末质量×100% 2结果与分析 2.1标准曲线的制作 X：芦丁含量（mg） 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 Y:吸光度（nm） 0 0.311 0.576 0.879 1.137 1.365 2.2超声波提取因素影响的分析 2.2.1提取时间对提取率的影响 分别称取1g银杏叶粉末于4