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血清總蛋白测定(双缩脲试剂法)
生物化学实验报告 姓 名: 学 号: 专业年级: 组 别: 生物化学与分子生物学实验教学中心 实验名称 实验日期 2014-1-21 实验地点 合作者 指导老师 评分 教师签名 批改日期 实验目的实验原理 (H2NOC-NH-CONH2)Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫做双缩脲反应。两分子尿素加热脱氨缩合成的双缩脲(H2N-OC-NH-CO-NH2),因分子内含有两个邻接的肽键,在碱性溶液中可与Cu2+发生双缩脲反应 ,生成紫红色络合物;蛋白质分子含有大量彼此相连的肽键(-CO-NH-),同样能在碱性条件下与Cu2+发生双缩脲反应,生成的紫红色络合物,且在540nm处的吸光度与蛋白质的含量在10~120g/L范围内有良好的线性关系。 材料与方法 a.各管混匀,观察各试管颜色 b.将各试管置于37℃水浴锅中加热20min,观察颜色 c.将试管中的液体倒入比色杯中,置于1100分光光度计的样品槽内,在波长540nm,以空白管调零,测S和U管吸的光度。 d.测定结束后,将比色杯中的样品回收进试管 依据公式算出结果 结果与讨论
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