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参考资料 ? ? 第二章? 药物体内转运 ? 一、影响药物胃肠吸收的因素有哪些？ 1.药物和剂型? 2.胃肠排空作用 :食物和药物影响 3、首过效应 4、肠上皮的外排机制 :肠粘膜上皮上存在P糖蛋白等外排系统 ?5、疾病: 胃肠疾病，一般难预测 6.药物相互作用 :包括：改变肠腔PH，改变溶解度，形成复合物，吸附作用，影响胃肠活动，抑制前药活性，竞争同一载体 二、简述常用的研究肠吸收的方法及特点。 1）整体动物实验法：能够很好地反映给药后药物的吸收过程，是目前最常用的研究药物吸收的实验方法。但是存在以下缺点： ??? (1)不能从细胞或分子水平上研究药物的吸收机制； ??? (2)生物样本中的药物分析方法干扰较多，较难建立； ??? (3)由于试验个体间的差异，导致试验结果差异较大； (4)整体动物或人体研究所需药量较大，周期较长。这些缺点使整体动物模型和人体 试验方法不适合应用于药物开发早期的快速筛选工作。 2）在体肠灌流法：本法能避免胃内容物和消化道固有生理活动对结果的影响。 3）离体肠外翻法：该法可根据需要研究不同肠段的药物吸收或分泌特性及其影响因素。 4）Caco-2细胞模型法：Caco-2细胞的结构和生化作用都类似于人小肠上皮细胞，并且含有与刷状缘上皮细胞相关的酶系。应用Caco-2细胞模型研究药物吸收具有许多整体和离体模型所不具备的优点： ?? (1) 由于Caco-2细胞易于培养且生命力强，细胞培养条件相对容易控制，能够简便、快速地获得大量有价值的信息; ?? (2)Caco-2细胞来源是人结肠癌细胞，同源性好，可用来测定药物的细胞摄取及跨细胞膜转运; ?? (3)存在于正常小肠上皮中的各种转运体、代谢酶等在Caco-2细胞中大都也有相同的表达，因此更接近药物在人体内吸收的实际环境，可用于测定药物在细胞内的代谢和转运机制; ?? (4) 可同时研究药物对粘膜的毒性; ?? (5) 试验结果的重现性比在体法好。 不足：1）酶和转运蛋白的表达不完整，此外来源，培养代数，培养时间对结果有影响；2）缺乏粘液层，需要时可与HT-29细胞共同培养。 三、研究脑分布的常用方法 1）在体法:大鼠颈动脉注射，取同侧脑 ?? （1）快速颈内动脉注射技术 ?? （2）静脉注射给药后脑部取样技术 ?? （3）脑灌流技术 ?? （4）脑血管灌流/除去毛细血管技术 2）离体法 ?? （1）离体脑微血管片的制备 ? ?（2）药物摄取试验 3）原代脑微血管内皮细胞（BCEC）培养技术 ?? （1）细胞摄取试验 ?? （2）转运试验 四、平衡透析法和超透析法研究药物蛋白结合率的优缺点及注意事项 1）平衡透析法: ? 优缺点：采用平衡透析法测定药物血浆蛋白结合率实验要求较低，简单易行，因此应用最为广泛。但缺点是比较费时，通常需要48小时左右才能达到平衡，故最好是在低温环境下进行，以防蛋白质可能被破坏。 ? 注意事项： （1）道南（Donnan）效应：由于蛋白质和药物均带电荷，这样膜两侧药物浓度即使在透析达到平衡后也不会相等，这种现象就称之为道南（Donnan）效应。采用高浓度的缓冲液或加中性盐溶液，最大限度地降低这种效应。 （2）药物在半透膜上有无保留：药物与膜的吸附影响因素较多，结合程度取决于药物的特点及膜的化学特性，当结合程度很高时，就会对结果影响较大。设立一个对照组，考察药物与半透膜的吸附程度，如果吸附严重，就应该考虑换膜或者采用其他研究方法。 （3）空白干扰：有时从透析膜上溶解下来的一些成分会影响药物的测定，如用紫外或荧光法，因此在实验之前应该对膜进行预处理，尽可能去除空白干扰。 （4）膜完整性检验：透析结束后，要检查透析外液中是否有蛋白溢出，即检查半透膜的稳定性，如有蛋白溢出，需换膜重复实验。 （5）当药物在水中不稳定或易被血浆中酶代谢时，不易用此法。 （6）应防止蛋白质的破坏。 2）超过滤法： ? 优缺点：该法优点是快速，只要有足够的滤液分析即可停止试验，可用于不稳定的药物的蛋白结合率的测定。如果用微量超过滤装置，蛋白用量可少，故可用于在体的血浆蛋白结合率测定，但用量少的情况下，要特别注意与膜结合的问题。 ? 注意事项： （1）不同型号的滤过膜对结合率测定结果的影响。随着超滤膜截留蛋白分子量的增大而结合率降低。 （2）不同的超滤时间对结合率的影响。有实验结果表明，随着超滤时间的延长，结合率也有所增加。 （3）不同压力下超滤对结合率的影响。压力对结合率的影响是双向的。随着超滤时所受压力增大，即离心转速增加时，蛋白结合率会增大，但当滤过压力超过一定程度时会使部分药物蛋白结合物也渗漏过膜，使药物蛋白结合率降低。五、五、常见的药物外排转运体有哪些？试述转运体与多药耐药的关系。 根据结构特征，药物外排转运体分为：P-GP（P-糖蛋白）;,MRP（