提取分离5剖析.ppt

现代天然药物提取分离技术 化学成分的分离纯化方法原理主要有以下几种： 1．根据物质溶解度差别进行分离； 2．根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行 分离； 3．根据物质的吸附性差别进行分离； 4．根据物质分子大小差别进行分离； 5．根据物质离解程度不同进行分离。 硅胶色谱层析 氧化铝色谱层析 活性炭色谱 大孔吸附色谱层析 聚酰胺色谱层析 在天然有机化合物分离及精制工作中，利用吸附原理进行分离的应用十分普遍。其中又以固－液吸附的应用更为广泛，分为： 物理吸附 ：如硅胶、氧化铝、活性炭、大空吸附 柱层析等色谱层析。 半化学吸附：如聚酰胺色谱层析等。 化学吸附：如酸性化合物与碱性氧化铝吸附或生物 碱被酸性硅胶吸附等有化学反应的吸附 色谱。 物理吸附（physical adsorption）：又叫表面吸附，是由溶液的分子（含溶质及溶剂）与吸附剂表面分子的分子间力的相互作用而引起的。所以吸附分离效果一般与吸附材料的比表面积有直接关系。 特点：选择性，吸附与解析过程可逆、快速。在实际应用最广泛，如硅胶、氧化铝等色谱层析法。 物理吸附的基本规律：相似相容（按极性大小是影响物理吸附过程的主要因素）——“相似者易于吸附”，竞争机制。 其分离效果与吸附剂、展开剂和被分离物质的性质（结构）决定的。 吸附能力微弱于氧化铝，显微酸性。通式SiO2.x H2O表示，分子中具有硅氧环交链结构，同时颗粒表面具有很多硅醇基，由于硅醇基能和许多化合物形成氢键而具有一定的吸附作用，所以硅胶吸附力的强弱与硅醇基的含量有关。 为极性色谱层析材料，对极性成分吸附力强，对非极性成分吸附力弱；价格一般便宜，不需回收处理重复使用。 硅胶吸附力的强弱还与硅胶含水量的多少有关，含水量愈大，吸附能力愈弱。在一定温度下除去水分就可以使硅胶活化，在硅胶中加入一定量的水可改变其活性。 常用的规格有：100－200目，200－300目，薄层用硅胶。 （1）装柱：有湿法装柱和干法装柱两种方式。 （2）上样：有湿法上样和干法上样两种方式。 样品量：硅胶/氧化铝＝1：30－60 （3）洗脱 流动相选择：可以利用TLC帮助选择，但因TLC 得吸附力强，故应选择使所需组分的Rf值在0.3－ 0.6时最好。若样品中组分较多，TLC展开上半点 距离较近，则应考虑用梯度洗脱法洗脱。 （4）检识收集 微碱性 对于分离植物中的生物碱等碱性成分较理想。 粉末状活性炭 颗粒状活性炭 锦纶活性炭 活性炭为非极性色谱层析材料，对脂溶性成分吸附力强，对极性成分吸附力弱。 水的洗脱力最弱，而有机溶剂较强。 目前活性炭色谱是除去脂溶性色素、分离氨基酸、糖类及某些甙类等水溶性化合物的主要方法之一。 （1）结构性质特点 多为苯乙烯、丙烯酸酯及其衍生物的高聚体材料，白色球形颗粒，具有较大的孔径和比表面积。 理化性质稳定，不溶于水、酸、碱及有机溶剂，在水中有良好的吸附选择性。 优点：载样量大，选择性好，易解析、流体阻力小、机械强度高、可重复使用、价格适当。 （2）分类 根据树脂表面修饰基团性质不同，分为非极性和中 （弱）极性和极性三大类。 非极性：树脂材料，其表面不带其它功能性修饰基团。 可通过与小分子内疏水部分作用吸附样品中的 有机物。目前常用，如D101。 中（弱）极性：含酯基的吸附树脂，其表面兼有亲水 和疏水两部分。如AB-8（南开化工） 极性：其上含有酰胺、氰基、羟基等极性功能的基团。 如NKA－9。 说明： （3）分离原理 吸附性和分子筛相结合的分离材料。其吸附性是由于范德华力或产生弱氢键吸附德结果，分子筛是由于其本身为多孔性结构特点决定的。 （4）性能参数及意义 极性：非极性、弱极性、极性。 比表面积：与载样量有关。 孔径：与分子筛作用相关。 粒径：与柱效有关。 目前国内外有多种型号大孔吸附树脂材料，选择时应综合考虑树脂结构性质和待分离样品的结构性质、大小选择合适的树脂材料。