【2017年整理】【三维设计】届高三生物一轮复习(word版资料)：选修3 现代生物科技专题.docVIP

第一讲基因工程 [循着图示·想一想] 知识点二　基因工程的基本操作程序 知识点三　蛋白质工程 [结合题目·试一试] 判断下列叙述的正误 (1)切割质粒的限制性核酸内切酶均能特异性地识别6个核苷酸序列(2014·江苏卷T23-A)(×) (2)载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因(2014·江苏卷T23-C)(×) (3)抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达(2014·江苏卷T23-D)(√) (4)设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列(2013·江苏卷T6-A)(×) (5)用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列(2013·江苏卷T6-B)(√) (6)PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶(2013·江苏卷T6-C)(×) (7)外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制(2013·安徽卷T6-B)(×) (8)每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点(2011·浙江卷T6-B)(√) (9)蛋白质工程可以合成自然界中不存在的蛋白质(√)(2011·江苏卷T14-A) (10)将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada(2011·浙江卷T6-C)(×) (11)限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶(×) (12)E·coli DNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端(×) (13)目的基因导入双子叶植物一般采用农杆菌转化法(√) (14)为培育抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体(×) (15)检测目的基因是否导入受体细胞可用抗原—抗体杂交技术(×) (16)蛋白质工程的目的是改造或合成人类需要的蛋白质(√) (17)蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构(×) (18)由大肠杆菌工程菌获得人的干扰素后可直接应用(×) 考点一基因工程的操作工具 [必备知能] 1．限制性核酸内切酶 (1)识别序列的特点：呈现碱基互补对称，无论是奇数个碱基还是偶数个碱基，都可以找到一条中心轴线，如图，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。如以中心线为轴，两侧碱基互补对称；以为轴，两侧碱基互补对称。 (2)切割后产生末端的种类——黏性末端和平末端。 黏性末端：是限制酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA的两条链分别切开时形成的(错位切)，如下图所示： 平末端：是限制酶在识别序列的中轴线切开时形成的(平切)，如下图所示： 2．限制酶与DNA连接酶的关系 [易误提醒] 关于工具酶的五个注意点 (1)限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外，这样才能保证标记基因的完整性，有利于对目的基因的检测。 (2)为使目的基因与载体形成相同的DNA片段末端连接，通常使用同一种限制酶将二者切割，但如果不同的限制酶切割DNA分子所产生的末端也存在互补关系时，则两末端也可连接。 (3)限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。 (4)限制酶是一类酶，而不是一种酶。 (5)DNA连接酶起作用时，不需要模板。 3．载体具备的条件 条件 目的 稳定并能复制 目的基因稳定存在且数量可扩大 有一个至多个限制酶切割位点 可携带多个或多种外源基因 具有特殊的标记基因 便于重组DNA的鉴定和选择 4．基因工程的理论基础 [必明考向] 考向　基因工程的操作工具 1．(2012·江苏高考)下图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题： (1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由_______________________连接。 (2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是________末端，其产物长度为________________________________________________________________________。 (3)若图1中虚线方框内的碱基对被T－A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有________种不同长度的DNA片段。 (4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是________。在导