【2017年整理】8.化验作业指导书.docVIP

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【2017年整理】8.化验作业指导书

目 录 一、目的: 1 二、适用范围: 1 三、作业流程: 1 四、作业内容: 2 (一)、效价的测定: 3 1、原理: 3 2、方法: 4 (二)、总糖的测定: 4 1、原理: 4 2、测定: 4 (三)、还原糖的测定: 5 1、原理: 5 2、测定: 5 (四)、氨基氮的测定: 7 1、原理: 7 2、测定: 7 五、注意事项: 8 六、加强责任制及生产安全教育: 8 安全生产管理制度 16 职工安全生产公约..................................................................................18 化验工段作业指导书 一、目的: 为了规范化验人员的操作技能,保证化验人员的人身安全,要做到操作必须规范,数据必须真实、准确。 二、适用范围: 适用于化验工段全体员工。 三、 作业流程: 按规定准时到岗,换好工作服,做好交接班准备,进行交接班。 交接班时,当场将工作交接清楚,将存在的问题找出来,看仪器是否正确(分光光度计、干燥箱、恒温水浴锅、电炉等),药品试剂是否够用,常用的玻璃仪器是否放入干燥箱,卫生是否清洁,双方交接无误后接班人签名,交接人方可离岗,接班人正常工作。 根据当日无菌室发的《生产调度单》和《补料单》做好本班工作计划。 根据化验原始记录,看看各罐生长情况,效价长势情况,总糖、氨基氮消耗情况,如果结果偏差大的重新取样复样,认真寻找原因,将结果填入原始记录,并注明复样,如有特殊情况汇报工作。 按规定时间取样,做样前对所做样的仪器和玻璃仪器做好充分的准备,放在工作台上,做效价和糖所用的试剂临用时混合。 取样后,进行各项含量分析,完成后将结果随时填入原始记录,如有填错应及时改正,并签名,原始记录填写完整后,认真核对确定无误后签字发出报告单。 随时清理和洗涤玻璃仪器和工作台,及时处理废料残液,始终保持现场的整洁有序,玻璃仪器轻拿轻放。 如有化验,结果偏差大,该复样的重新取样、复样。 剩余时间,折叠滤液用的滤纸。 清理卫生,做好交班准备。 四、作业内容: 发酵过程的中间分析是生产控制的眼睛,它显示了发酵过程中微生物的主要代谢变化,供操作人员做好分析控制发酵工艺并处理异常发酵的重要依据。 化验项目(每8h取样一次) 项目 罐类 PH (无菌) 杂菌 (无菌) 菌浓 (无菌) 总糖 (化验) 还原糖(化验) 氨基氮(化验) 效价 (化验) 种 子 罐 消后 √ √ √ √ 接后 √ √ √ √ √ 30h—移前 √ √ √ √ √ 发 酵 罐 消后 √ √ √ √ √ √ 接后 √ √ √ √ √ √ 40h—放罐 √ √ √ √ √ √ √ 糖罐 √ √ (一)、效价的测定: 1、原理: 在培养过程中,产生菌体的生物合成能力和抗生素的积累程度,通常都以抗生素的效价单位表示。发酵过程中,定期测定发酵效价单位,可使我们及时了解发酵过程的趋势,帮助我们选择最合适的发酵条件,并控制最合适的发酵周期。效价单位测定一般采用化学测定和生物测定法。现我们采用化学测定法,方法简速。 2、方法: (1)、准确吸取2.5ml发酵液于25ml的具塞比色管中,加无水乙醇将发酵液全部冲下(起步效价做3倍,加无水乙醇5ml;效价超过5500改做4倍,加7.5ml无水乙醇),充分摇匀后放入37℃恒温水浴中30min,取出后摇匀过滤。 (2)、精确吸取1ml于盛有10ml硼缓溶液和8ml正丁醇溶液的25ml的比色管中,充分摇匀再次放入37℃恒温水浴中20min。 (3)、吸取上清液4ml,加4ml无水乙醇摇匀,在波长408nm的722分光光度计上进行比色。 讨论: (1)、测定样品时,应力求与制作标准曲线和条件相同。 (2)、正丁醇和硼缓在临用时混合,混合时不能快。 (3)、空白,样品所用之比色皿,应分别固定使用。 (4)、比色前15min,打开分光光度计预热。 (二)、总糖的测定: 1、原理: 淀粉系多糖类,经酸水解后生产单糖,利用其分子中的醛基在碱性溶液中将高价铜还原成低价铜,剩余铜在酸性溶液中与碘化钾作用析出游离碘,可用硫代硫酸钠滴定,根据空白与样品之差推出糖含量。 2、测定: (1)、发酵液过滤后,精吸滤液2.5ml于盛有5ml(6mol/L)的HCl的25ml刻度试管中,在沸水中加热15min,冷却,用蒸馏水稀释至刻度。 (2)、正确吸取上述水解溶液5ml,斐林A10ml、斐林B10ml于150ml的三角瓶中,稍震摇,在电炉上加热,煮沸3min,同时以A、B液各10ml、水5ml做空白。 (3)、冷却至室温,加KI5ml、加6mol/L

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