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* 微生物的培养和利用 第一节 有关微生物的基本理论 一、什么是微生物？ 1.微生物的概念 体型微小，结构简单，通常需要借助光学显微镜或电子显微镜才能看清楚的生物。 2.微生物类群 3.微生物的作用 ⑵分泌多种抗生素：链霉素、土霉素、氯霉素、红霉素 ⑴生产传统的发酵产品：啤酒、醋、酸奶、泡菜等 蓝藻染绿安徽巢湖 4.微生物菌落及其研究意义 细菌菌落 单个细菌等微生物在固体培养基上大量繁殖，形成肉眼可见的具有一定形态结构的细胞群体称为菌落 霉菌菌落 一个菌落来自一个祖先细胞 一个菌落内的细胞在遗传上没有差别 形成单菌落是获得微生物纯种的途径 菌落的形态、颜色、粘稠度等是鉴别菌种的重要依据 二、培养基 1.什么是培养基？ 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质称为培养基 2.培养基中所含的营养物质 （1）水 （2）无机盐 （3）碳源 无机碳源:CO2、NaHCO3—自养型微生物 有机碳源：糖类、脂类等—异养型微生物 （4）氮源— N2、NH3、铵盐、硝酸盐、尿素、牛肉膏、蛋白胨 （5）特殊营养物质—维生素、氨基酸、碱基等微量有机物 3.培养基的种类 ? ①固体培养基 用于分离微生物、计数、鉴定 ②液体培养基 用于工业生产、扩大培养 ③半固体培养基 用于观察、保存、鉴定菌种 ⑴按培养基的性质分类 LB培养基配方： 蛋白胨 10g 酵母提取物 5g NaCl 10g 琼脂 15g（固体培养基） 加水至1L ①天然培养基：成分不明确，用于工业生产 如：用榨取的葡萄汁培养酵母菌 用马铃薯汁培养细菌 ②合成培养基：成分明确，用于微生物分类、鉴定、保存、科研 如：葡萄糖10g 尿素2g NaCl 5g K2HPO4 5g 琼脂糖15g ③半合成培养基：部分成分不明确，用于扩大培养、生产及某些特殊用途 如：马铃薯 200克 葡萄糖 20克 琼脂 15~20克 ⑵按培养基的营养成分分类 ①鉴别培养基： ⑶按培养基的用途分类 不同的微生物表现出不同的菌落外貌特征，从而鉴别微生物 伊红美兰培养基 刚果红与纤维素发生特异颜色反应 ②选择培养基： 只能生长特定的微生物，用于分离菌种 酵母菌、霉菌等真菌 金黄色葡萄球菌 固氮菌 自养型微生物 加入青霉素的培养基，分离 加入高浓度食盐的培养基，分离 不加氮源的无氮培养基 ，分离 不加含碳有机物的无碳培养基，分离 不加其他碳源只加入纤维素的培养基，分离 能分解纤维素的微生物 不加其他氮源只加入尿素的培养基，分离 可以利用尿素的微生物 ? ? ? 产淀粉酶菌能产生胞外淀粉酶 淀粉培养基 鉴别培养基 抗生素 X-gal 卵磷脂 选择 鉴别 4.培养基的配制原则 ⑴目的明确 依据微生物种类（新陈代谢类型）、所需营养 培养目标（实验或生产） ⑵营养比例协调 营养成分合理搭配 ⑶pH适宜 细 菌 6.5～7.5 放 线 菌 7.5～8.5 真 菌 5.0 ～6.0 三、微生物培养的无菌操作技术 1.消毒： 目的：使用较温和的物理、化学方法杀死物体表面或内部一部分有害的微生物（不包括芽孢和孢子） 具体方法： 煮沸消毒法（100℃5~6min） 巴氏消毒法（70~75℃30min 或80℃15min） 化学药剂消毒法（酒精、次氯酸钠、氯气等） 处理对象： 操作者、实验材料（外植体）、水源、牛奶、操作空间等 *