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第三章 遗传的分子基础 第一节 核酸是遗传物质的证据 肺炎双球菌 菌落 (肉眼观察) 荚膜 (显微镜观察) 毒性 (动物实验) R型细菌 S型 细菌 粗糙 光滑 有荚膜 无荚膜 无毒 有毒 一、肺炎双球菌转化实验(格里菲思) R型 和 S型菌的比较 (1)R型菌 1.肺炎双球菌的体内转化实验(格里菲思) (2)S型菌 (3) 加热 杀死 + 混合 (4) + 实验者 实验结果 实验结论 不足之处 肺炎双球菌体内转化实验 格里 菲思 R型活细菌注射小鼠→ S型活细菌注射小鼠→ 加热杀死的S型细菌注射小鼠→ R型活细菌和加热杀死的S型细菌混合注射→ 小鼠不死 小鼠死亡,体内有S型活菌 小鼠不死 小鼠死亡,体内有S型活菌 S型菌 体内有 转化因子 没有具体说明转化因子是什么物质。 2.肺炎双球菌的体外转化实验(艾弗里) 转化因子 转化因子到底是什么,DNA或蛋白质或是其他的有机物?实验思路是什么?如何操作? 设法把DNA和蛋白质分开,单独直接观察它们作用。 2.肺炎双球菌的体外转化实验(艾弗里) DNA+DNA酶 只长R型菌 只长R型菌 只长R型菌 S型菌 实验结论:DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质。 实验缺陷:艾弗里提取的DNA最高时,还含有少量的蛋白质(至少含0.02%)。 有没有更好的材料,可以不用经过人工提纯DNA,就能单独地去观察DNA或蛋白质的作用呢? 噬菌体(含DNA病毒)是寄生在细菌体内的病毒 T2噬菌体是专门寄生在大肠杆菌体内的病毒 二、噬菌体侵染细菌实验 (含C、H、O、N、P) (含C、H、O、N、S) 噬菌体侵染细胞过程 单击画面继续 DNA是遗传物质的直接证据:噬菌体侵染细菌实验 C、H、O、N、P 1、想要知道噬菌体浸染细菌时DNA和蛋白质的“活动路线”,本实验可以采用什么实验方法? 2、你会选取哪种元素的同位素来分别标记DNA和蛋白质? 同位素示踪法 C、H、O、N、S 35S 32P 蛋白质: DNA: 3.怎样让噬菌体蛋白质中的S元素和DNA中的P元素被标记 用含35SO42-的培养基培养大肠杆菌,再用噬菌体去感染这种大肠杆菌 先用含32PO43-的培养基培养大肠杆菌,再用噬 菌体去感染这种大肠杆菌 1952年赫尔希和蔡斯 讨论1:用35S标记的实验,沉淀物中有少量放射性的原因是什么? 可能由于搅拌不充分,有少量35 S的噬菌体蛋白质外壳吸附在细菌表面,随细菌离心到沉淀物中,使沉淀物中出现少量的放射性 讨论1:用35S标记的实验,沉淀物中有少量放射性的原因是什么? 讨论2: 用32P标记的实验,上清液中有少量放射性的原因是什么? 2讨论:用32P标记的实验,上清液中有少量放射性的原因是什么? 1、是保温时间过短,有一部分噬菌体没有侵染到大肠杆菌细胞内,经离心后分布于上清液中,使上清液出现放射性; 2、是保温时间过长,噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放子代,经离心后分布于上清液,也会使上清液放射性含量升高。 结论:DNA是遗传物质 假设某种病毒(例如烟草花叶病毒)中不含DNA,只含RNA与蛋白质,那么什么才是遗传物质呢?你可以设计怎样的实验来证实? 烟草花叶病毒(TMV) 【敢于质疑】 DNA是唯一的遗传物质吗? 三、烟草花叶病毒的感染和重建实验 烟草花叶病毒感染实验 RNA 蛋白质 感染烟草 感染烟草 RNA 酶处理 实验的结论是什么? 分离 分离 重组 重组 感染 新的病毒 实验的结论是什么? 烟草花叶病毒重建实验 弗伦克尔实验 遗传物质 生物类型 举 例 DNA RNA 一切生物的遗传物质都是核酸。 细胞生物 DNA病毒 RNA病毒 细菌、 真菌、动物、植物 等 噬菌体等 烟草花叶病毒、HIV、SARS 等 小 结 DNA是主要的遗传物质 核心问题:谁在充当生物的遗传物质角色? 说明DNA是遗传物质的实验证据: ▲ 肺炎双球菌的转化实验 ▲ 噬菌体侵染细菌的实验 说明DNA不是唯一遗传物质的实验证据: ▲ 烟草花叶病毒的重建实验 重点内容: 1.某研究人员模拟肺炎双球菌转化实验,进行了以下4个实验: ①S型菌的DNA+DNA酶→加入R型菌→注射小鼠 ②R型菌的DNA+DNA酶→加入S型菌→注射小鼠 ③R型菌+DNA酶→高温加热后冷却→加入S型菌的DNA→注
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