梅毒检测技术及进展描述.ppt

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+ 明胶颗粒 梅毒抗原 + 抗原致敏颗粒 抗原致敏颗粒 血液中抗体 抗原抗体凝集 TPPA试验原理示意图 * 4+: 粒子光滑覆盖整个孔底,有时边缘有折叠 3+: 粒子光滑覆盖大部分底 2+:粒子光滑聚集覆盖孔底,周围有一细胞环 1+: 粒子光滑集聚覆概孔底,周围有一明显细胞环 ±: 粒子沉集孔底,中央形成一小点 –: 粒子紧密沉积孔底中央 TPPA试验结果判读 敏感性 特异性 病期 一期 二期 隐性 临床试验a 100 100 100 美国CDC 88 100 100 95 a:均为RPR阳性标本 ELISA/ CLIA ELISA试验是用重组梅毒螺旋体抗原包被固相板条,加上梅毒血清和单克隆抗体酶标记物,形成抗原抗体复合物与酶标记物结合,用酶联检测仪判定试验阳性反应。 本法可用于大样本血清检测。 化学发光法的临床应用意义基本同ELISA 化学发光法的敏感性?? 梅毒免疫层析快速检测方法(全血法) * 梅毒免疫层析快速检测方法(血清、血浆法) 梅毒螺旋体蛋白 印迹试验(WB) 荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS) 梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义 作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)初筛阳性标本的确证试验,排除RPR 假阳性。 不能区分既往感染和现症感染,应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。 梅毒螺旋体抗原血清试验不能作为疗效观察的指标。 非梅毒螺旋体抗原血清试验结果解释示意图 早期 晚期 一期 二期 早期潜伏 晚期潜伏 三期 治疗前 治疗后 阳性 阴性 梅毒螺旋体抗原血清试验结果解释示意图 早期 一期 二期 早期潜伏 晚期 晚期潜伏 三期 治疗前 治疗后 阳性 阴性 梅毒血清学试验结果解释(梅毒临床诊断参考依据) * 试验结果 参考结果解释* 梅毒螺旋体抗原 血清试验 非梅毒螺旋体抗原 血清试验 阳性 阳性 可能为现症梅毒 阴性 阳性 非梅毒螺旋体血清试验假阳性 阳性 阴性 临床治愈的早期梅毒(既往感染者) 或极早期梅毒 阴性 阴性 排除梅毒感染 或极早期梅毒 问题:此结果解释适用于先天(胎传)梅毒吗? 先天(胎传)梅毒的实验室诊断依据 查到螺旋体 其抗心磷脂抗体滴度持续上升 其抗心磷脂抗体滴度高于其母亲四倍(2个稀释滴度) 检测抗梅毒的IgM特异性抗体阳性 随访18个月观察抗体的变化(哪一类抗体?) 《预防艾滋病、梅毒和乙肝母婴传播工作实施方案》 问题:IgG抗体和IgM抗体有什么区别? 梅毒IgM抗体(TP-IgM) IgM抗体的产生是感染后的早期体液免疫应答反应。IgM分子比IgG较大,所以IgM抗体不能通过胎盘屏障。而母亲的IgG抗体可以通过胎盘屏障传给胎儿。因此若在新生儿血中检测到IgG抗体不能作为先天梅毒的诊断依据,而IgM抗体可为先天梅毒的诊断依据。 IgM抗体检测其特异性较高,但敏感性较低。因此,IgM抗体检测阴性,不能排除先天梅毒感染。 * 先天(胎传)梅毒的实验室诊断依据 查到螺旋体 其抗心磷脂抗体滴度持续上升 其抗心磷脂抗体滴度高于其母亲四倍(2个稀释滴度) 检测抗梅毒的IgM特异性抗体阳性 随访18个月观察抗体的变化(特异性抗体) 梅毒实验室检测策略探讨 梅毒实验室检测策略思考 * 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 梅毒螺旋体抗原血清学试验 排除试验假阳性 确证梅毒螺旋体现症感染 排除治愈的既往感染者 确证梅毒螺旋体现症感染 ?RPR:初筛试验 TPPA:确证试验 梅毒实验室检测策略思考 方法选择依据 敏感性、特异性(试剂评估) 操作流程(可及性) 试剂的价格、结果时间(可接收性) * ?初筛目的和方法选择 规范化梅毒实验室检测要求 根据目的选择检测方法及检测策略。 可采用任何一类梅毒血清学检测方法作为筛查试验。 * 非梅毒螺旋体抗原血清试验 快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR) 甲苯胺红不加热血清试验(TRUST) 性病研究实验室试验 (VDRL) 血清学检测试剂的种类 梅毒螺旋体抗原血清试验 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA) 梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA) 梅毒酶联免疫吸附试验(ELIS

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