注射用龍葵总碱(Coramsine)的抗肿瘤机理研究.docVIP

注射用龙葵总碱（Coramsine）的抗肿瘤机理研究 一、对荷瘤（S180）小鼠血清TNF-α和IL-2的影响 在药效学实验中，我们观察到龙葵总碱具有一定的抗肿瘤作用，且对放、化疗具有增效作用。为了进一步观察其对免疫因子的影响，探讨其抗肿瘤的作用机理，我们观察了其对荷瘤小鼠血清TNF-α和IL-2水平的影响。 （一）实验材料 1、药材与试剂 龙葵总碱，6mg/瓶，由吉林市卓怡康納制药有限公司提供，批号氟尿嘧啶注射液（5-Fu），天津金耀氨基酸有限公司，批号：0505231；华蟾素注射液，安徽金蟾生化股份有限公司，批号：050316；生理盐水，南京小营制药厂，批号：2005052505；白介素-2（IL-2）放射免疫分析药盒，北京科美东雅生物技术有限公司，批号肿瘤坏死因子（TNF）放射免疫分析药盒，北京科美东雅生物技术有限公司，批号 2、实验动物：ICR小鼠，由南京医科大学实验动物中心（生产许可证：SCXK(苏)2002-0031）。 3、实验仪器：MP12001电子天平，上海市恒平科学仪器有限公司；AR2140型电子分析天平，奥赛斯国际贸易（上海）有限公司。 4、实验条件：给药前后，小鼠分笼饲养，用全价颗粒饲料(由江宁青龙山动物繁殖场提供)喂养；温度20~25℃，湿度40~60%。 5、统计方法：本实验量反应资料采用方差分析，统计软件用SPSS13.0。 （二）实验方法 无菌条件下抽取ICR小鼠腹腔内生长8天的腹水癌细胞悬液，癌细胞悬液和灭菌生理盐水按1：3稀释，取ICR小鼠70只，体重18～22g，接种稀释后的癌细胞悬液0.2ml于腋部皮下。24h后随机分为7组，即模型组、5-Fu组（25mg/kg）、华蟾素组（3g/kg）和SNSA小、中、大剂量组（1mg/kg、2mg/kg、4mg/kg）及口服组（2mg/kg），每组10只，另取10只小鼠作为正常对照组。分别静脉注射给予相应药物(正常对照组和模型组注射等容积生理盐水，口服组灌胃给药)。给药容积均为10ml/kg。给药8天后，眼眶取血，常规分离血清，-20℃保存，待测TNF-α和IL-2；脱颈椎处死小鼠，剥取肿瘤，称重，按照下面公式计算抑瘤率；取胸腺、脾脏，称重，按下面公式计算胸腺指数和脾指数[1]。 抑瘤率(%)= 对照组平均瘤重－实验组平均瘤重 ×100% 对照组平均瘤重 胸腺（脾）指数= 胸腺（脾）重量（g） ×100 体重 （三）实验结果 小鼠接种S180移植性实体瘤后，3天皮下即可触到肿瘤，8天后解剖肿瘤平均重量均大于1g，龙葵总碱三个剂量组小鼠肿瘤浸润范围均小于模型组，瘤体易剥离，肿瘤重量明显减轻(p0.01)。模型组小鼠血清TNF-α、IL-2含量均低于正常对照组，龙葵总碱各组均可以升高血清TNF-α、IL-2含量，其中龙葵总碱中、大剂量组和模型组相比，具有统计学意义(p0.05，p0.01)。结果见表1～3。 Table 1 Effects of Coramsine on tumor weight inhibitory rates of beared S180 mice（±S，n＝10） Group Dose（mg/kg） tumor weight（g） tumor weight inhibitory rates（％） Control － 1.55±0.43 － 5-Fu 25 0.61±0.28** 60.9 Huachansu 3×103 0.87±0.33** 43.6 Coramsine 1 1.03±0.47* 33.6 Coramsine 2 0.84±0.47** 45.5 Coramsine 4 0.70±0.23** 54.5 Coramsine oral group 2 1.28±0.39 17.4 Compared with control group，* p＜0.05，** p＜0.01。 Table 2 Effects of Coramsine on thymus gland index and spleen index of beard S180 mice（±S，n=10） Group Dose（mg/kg） thymus gland index spleen index Normal － 0.261±0.061 0.881±0.196 Control － 0.253±0.046 0.869±0.200 5-Fu 25 0.132±0.043** 0.599±0.217* Huachansu 3×103 0.260±0.056 0.784±0.256 Coramsine 1 0.271±0.072 0.880±0.