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注射用龍葵总碱(Coramsine)的抗肿瘤机理研究
注射用龙葵总碱(Coramsine)的抗肿瘤机理研究
一、对荷瘤(S180)小鼠血清TNF-α和IL-2的影响
在药效学实验中,我们观察到龙葵总碱具有一定的抗肿瘤作用,且对放、化疗具有增效作用。为了进一步观察其对免疫因子的影响,探讨其抗肿瘤的作用机理,我们观察了其对荷瘤小鼠血清TNF-α和IL-2水平的影响。
(一)实验材料
1、药材与试剂
龙葵总碱,6mg/瓶,由吉林市卓怡康納制药有限公司提供,批号氟尿嘧啶注射液(5-Fu),天津金耀氨基酸有限公司,批号:0505231;华蟾素注射液,安徽金蟾生化股份有限公司,批号:050316;生理盐水,南京小营制药厂,批号:2005052505;白介素-2(IL-2)放射免疫分析药盒,北京科美东雅生物技术有限公司,批号肿瘤坏死因子(TNF)放射免疫分析药盒,北京科美东雅生物技术有限公司,批号
2、实验动物:ICR小鼠,由南京医科大学实验动物中心(生产许可证:SCXK(苏)2002-0031)。
3、实验仪器:MP12001电子天平,上海市恒平科学仪器有限公司;AR2140型电子分析天平,奥赛斯国际贸易(上海)有限公司。
4、实验条件:给药前后,小鼠分笼饲养,用全价颗粒饲料(由江宁青龙山动物繁殖场提供)喂养;温度20~25℃,湿度40~60%。
5、统计方法:本实验量反应资料采用方差分析,统计软件用SPSS13.0。
(二)实验方法
无菌条件下抽取ICR小鼠腹腔内生长8天的腹水癌细胞悬液,癌细胞悬液和灭菌生理盐水按1:3稀释,取ICR小鼠70只,体重18~22g,接种稀释后的癌细胞悬液0.2ml于腋部皮下。24h后随机分为7组,即模型组、5-Fu组(25mg/kg)、华蟾素组(3g/kg)和SNSA小、中、大剂量组(1mg/kg、2mg/kg、4mg/kg)及口服组(2mg/kg),每组10只,另取10只小鼠作为正常对照组。分别静脉注射给予相应药物(正常对照组和模型组注射等容积生理盐水,口服组灌胃给药)。给药容积均为10ml/kg。给药8天后,眼眶取血,常规分离血清,-20℃保存,待测TNF-α和IL-2;脱颈椎处死小鼠,剥取肿瘤,称重,按照下面公式计算抑瘤率;取胸腺、脾脏,称重,按下面公式计算胸腺指数和脾指数[1]。
抑瘤率(%)= 对照组平均瘤重-实验组平均瘤重 ×100% 对照组平均瘤重
胸腺(脾)指数= 胸腺(脾)重量(g) ×100 体重 (三)实验结果
小鼠接种S180移植性实体瘤后,3天皮下即可触到肿瘤,8天后解剖肿瘤平均重量均大于1g,龙葵总碱三个剂量组小鼠肿瘤浸润范围均小于模型组,瘤体易剥离,肿瘤重量明显减轻(p0.01)。模型组小鼠血清TNF-α、IL-2含量均低于正常对照组,龙葵总碱各组均可以升高血清TNF-α、IL-2含量,其中龙葵总碱中、大剂量组和模型组相比,具有统计学意义(p0.05,p0.01)。结果见表1~3。
Table 1 Effects of Coramsine on tumor weight inhibitory rates of beared S180 mice(±S,n=10)
Group Dose(mg/kg) tumor weight(g) tumor weight inhibitory rates(%) Control - 1.55±0.43 - 5-Fu 25 0.61±0.28** 60.9 Huachansu 3×103 0.87±0.33** 43.6 Coramsine 1 1.03±0.47* 33.6 Coramsine 2 0.84±0.47** 45.5 Coramsine 4 0.70±0.23** 54.5 Coramsine oral group 2 1.28±0.39 17.4 Compared with control group,* p<0.05,** p<0.01。
Table 2 Effects of Coramsine on thymus gland index and spleen index
of beard S180 mice(±S,n=10)
Group Dose(mg/kg) thymus gland index spleen index Normal - 0.261±0.061 0.881±0.196 Control - 0.253±0.046 0.869±0.200 5-Fu 25 0.132±0.043** 0.599±0.217* Huachansu 3×103 0.260±0.056 0.784±0.256 Coramsine 1 0.271±0.072 0.880±0.
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