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第四章 发 酵 工 程 发酵工程的定义 发酵工程(微生物工程,发酵技术),是指在最适发酵条件下,发酵罐中大量培养细胞和生产代谢产物的工艺技术,根据各种微生物的特性,在有养或无养条件下利用生物催化(酶)的作用,将多种低值原料转化成不同的产品的过程。 广义上的发酵工程由三部分组成: 上游工程、发酵工程和下游工程,其中上游工程包括优良菌株的选育,最适发酵条件(营养组成、pH、温度)的确定,营养物的准备等;下游工程指从发酵液中分离和纯化产品的技术 发酵工业必须具备的条件 1、某种适宜的微生物 2、要保证或控制微生物进行代谢的各种条件,即培养基的组成、温度、溶氧浓度、pH等 3、微生物发酵需要的设备 4、提取菌体或代谢产物或精致产品的方法和设备 发酵工程的特点 投资少 见效快 污染小 外源目的基因易高效表达 发酵工程的历史发展 19世纪末:厌氧发酵(酒精、乳酸、发酵食品) 1945年:通气搅拌发酵罐--好氧发酵(青霉素等抗生素) 20世纪50年代:代谢控制发酵(氨基酸、核酸等) 20世纪70年代:固定化酶连续发酵 20世纪80年代:现代发酵工程技术(与基因操作、细胞工程技术相结合) 发酵工程的内容 1、微生物的菌体发酵(酵母、单细胞蛋白、药用真菌、杀虫剂等) 2、微生物酶发酵(淀粉酶、糖化酶、氨基酰化酶、青霉素酰化酶等); 3、微生物代谢产物发酵(初级代谢产物、次级代谢产物) 4、微生物的转化发酵:微生物转化是利用微生物细胞的一种或多种酶,把一种化合物转变成更有经济价值的产物(抗生素转化) 5、生物工程细胞的发酵:是指利用生物工程技术所获得的细胞进行培养的新型发酵,其产物多种多样。(胰岛素、干扰素、青霉素、酚化酶) 初级代谢产物和次级代谢产物 在菌体对数生长期所产生的产物,如氨基酸、核苷酸、蛋白质、核酸、糖类等,是菌体生长繁殖所必需的,这些产物叫做初级代谢产物。 在菌体生长静止期,某些菌体能合成一些具有特定功能的产物,如抗生素、生物碱、植物生长因子等,这些产物与菌体的生长繁殖无明显关系,叫做次级代谢产物。 三、发酵技术的应用 1.医药工业:抗生素、维生素、胰岛素、乙肝疫苗、干扰素等; 2.食品工业:微生物蛋白、氨基酸、饮料、酒类和一些食品添加剂(柠檬酸、乳酸、天然色素等); 3.能源工业:酒精、沼气、微生物采油; 4.化学工业:化工原料(乙醇、丙酮、丁醇)、生物表面活性剂; 5.农牧业:生物固氮、生物杀虫剂、微生物饲料; 6.冶金工业和环境保护。 第二节微生物反应器及发酵系统 生物反应器(发酵罐):是为微生物、酶或动植物细胞(或组织)作为生物催化剂的生物反应过程提供良好环境的核心设备。根据生物催化剂的不同,生物反应过程分为:发酵过程、细胞培养过程和酶反应过程等,与生物反应过程相应的反应器的为发酵罐、动植物细胞反应器和酶反应器。 生物反应器在生物产品生产过程中,具有中心纽带作用,是实现生物技术产品产业化的关键设备,是连接原料和产物的桥梁。 因此,生物反应器的设计和操作与生物技术产品的质量、转化率和能耗关系紧密,直接影响到生产效益 发酵罐的特点 1、为细胞代谢提供一个适宜的物理及化学环境,使细胞能更快更好的生长 2、具有严密的结构 3、良好的液体混合性能 4、高的传质和传热速率 5、灵敏的检测和控制仪表 发酵罐的设计要求 1、节能 2、操作与控制方便 3、无菌条件好 4、尽量减少法兰连接 5、结构坚固、安全 6、防止死角、裂缝 7、易维修 法兰连接 连接就是把法兰盘放在固定在两处管口上的一对法兰的中间,然后用螺栓拉紧使其接合起来,成为一种可拆卸的。这种连接主要用于铸铁管、衬胶管、非铁金属管和法兰阀门等的连接,工艺设备与法兰的连接也都采用法兰连接。法兰连接的主要特点是拆卸方便、强度高、密封性能好。安装法兰时要求两个法兰保持平行、法兰的密封面不能碰伤,并且要清理干净。 发酵罐的类型 一、根据微生物生长代谢需要来分 好氧发酵罐:用于抗生素、酶制剂、酵母、氨基酸、维生素等产品的发酵,发酵过程需要氧气 厌氧发酵罐:丙酮、丁醇、酒精、啤酒、乳酸等产品的发酵,发酵过程不需要氧气 二、根据发酵罐的质量传递特点进行分类 机械搅拌发酵罐---依靠搅拌器提供能量使发酵液循环、混合、包括机械搅拌通风发酵罐和机械搅拌自吸式发酵罐 非机械搅拌发酵罐---依靠通入的空气或液体产生动力,带动发酵液循环、混合,包括喷射自吸式发酵罐、气升式发酵罐 三、根据容积分类 实验室发酵罐:500L以下 中试发酵罐:500-5000L 生产规模发酵罐:5000L以上 好氧发酵罐 1、机械搅拌通风发酵罐 搅拌的作用是增加拱氧量 2、自吸式发酵罐 机械搅拌自吸式发酵罐 喷射自吸式发酵罐:文氏管自吸式发酵罐和溢流喷射自吸式发酵罐 3
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