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绪论
名词解释
1.外植体(explant):由活植物体(in vivo)上切取下来以进行培养的那部分组织或器官。离体培养的材料,包括:器官、组织、细胞、原生质体。
2.愈伤组织:在组织培养中指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。
3.细胞全能性:植物体的每一个细胞都含有一个完整个体的全套基因,这些基因在适宜的外界条件下按照某种特定的程序先后表达,最终分化形成一个完整的植株。
4.脱分化:一个成熟细胞转变为分生状态并形成未分化的愈伤组织的现象叫做脱分化。
5.再分化:一个成熟的植物细胞经历了脱分化之后,经过培养还能形成完整的植株。再分化的过程有两种方式:器官发生方式,胚胎发生方式。
6.再生:指组织、器官、悬浮细胞和原生质体经培养后获得植株的过程。
7.继代:植物组织培养过程中,外植体在培养基上培养一段时间以后需要转移到新的培养基上进行培养,称为继代。
8、初代培养;接种某些外植体后,最初的几代培养,旨在获得无菌材料和无性繁殖系。即
9、消毒:是指杀死、消除或充分抑制部分微生物,使之不再发生危害作用。
10、灭菌:是指用物理或化学的方法,杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体,把所有生命的物质全部杀死。
简答
1.什么是植物组织培养?有哪些类型?
(1)植物组织培养(plant tissue culture)是指在无菌和人工控制的条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官(如根、茎、叶、花、果实、种子、胚、花药、子房等)、组织(如形成层、皮层、胚乳等)、细胞(如体细胞、生殖细胞花粉等)、原生质、幼小的植株进行培养,使其再生细胞或完整的植株的技术。
(2)组织培养分为五种类型:胚胎培养,器官培养(根、茎、叶、花、果实等),组织培养(茎尖分生组织、形成层、表皮组织等),细胞培养,原生质体培养。又可以根据培养方式的不同,分为固体培养和液体培养(纸桥,静置,旋转,震荡培养四种方式)。
2.什么是细胞全能性学说?如何理解?
(1)细胞全能性学说,即植物体的每一个细胞都含有一个完整个体的全套基因,这些基因在适宜的外界条件下按照某种特定的程序先后表达,最终分化形成一个完整的植株,称为细胞全能性(totipotency)
(2)必须满足两个条件:
一是要把这些细胞从植物体其余部分的抑制性影响下解脱出来,也就是说必须使部分细胞处于离体的条件下。
二是要给予它们适当的刺激,即给予它们一定的营养物质,并使它们受到一定的激素的作用。
(3)全能性体现的两个过程
一个已分化的细胞要表现它的全能性,必须经历两个过程,即首先要经历脱分化过程,然后再经历再分化过程。
3.培养基的营养组成:
(1)无机营养大量元素:氮、磷、钾、硫、钙、镁;浓度大于0.5mmol
(2)无机营养微量元素:铁、硼、锰、铜、锌、钼、氯;浓度小于0.5mmol
(3)有机营养:维生素、肌醇、氨基酸等
(4)植物生长调节剂:生长素类(2,4-D、NAA、 IAA、 IBA),细胞分裂素类(KT BA ZT ),其他类(GA ABA)
(5)附加物: 琼脂、活性碳、一些天然复合物。
4、组织培养在农业中的应用可以有以下10个方面:
(1)组织培养是转基因技术不可或缺的组成部分,无论是转基因受体的提供,还是转化细胞的筛选和再生,都需要有组织培养技术作为支撑。
(2)在自花授粉作物杂交育种中,或在异花授粉作物自交系选育过程中,采用花药培养技术不但可缩短杂合体纯合化所需的时间,而且还可以节省土地面积。
(3)在某些雌雄异株植物(如石刁柏)中,若把花药培养技术包括到制种程序中去,在后代就有可能得到均匀一致的单性群体,提高经济效益。
(4)在远缘杂交中,通过离体授粉或原生质体融合有可能克服受精前障碍,在通过幼龄合子胚培养可以克服受精后障碍,通过体细胞融合还有可能制造出细胞质杂种。
(5)对于无药可治的病毒病,可通过茎尖培养消除病毒,这对解决马铃薯种薯退化问题能发挥重要的作用,在其他很多植物中也可用以建立无毒原种。
(6)通过离体诱导不定芽或促进腋芽生枝,可对很多重要的园艺植物和名贵花卉、树种进行快速繁殖。
(7)应用在细胞水平上进行突变体选择的技术,可以在一定程度上使高等植物的育种程序微生物化,从而大大提高选择效率,节省时间和土地面积,并且不受季节的限制。
(8)体细胞无性系变异是除有性杂交和理化诱变之外的第三个变异来源。
(9)通过用人工种皮包被体细胞胚制造人工种子,为某些稀有和珍贵物种的繁殖提供了一种高效的手段。
(10)在无性繁殖植物中,通过对茎尖分生组织等离体材料进行超低温保存,不但可以大大节省空间,而且还可以避免病虫害的侵袭。
第一章
1、组织培养室的组成:准备室,温室,驯化室,培养室,无菌操作室,缓冲室。
2、接种器具:
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