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[生命科学研究进展复习—题目与答案
王义权老师(6题) 1、什么是DNA分子标记? DNA是生物遗传信息的载体,任何生物的遗传信息都具有种属特异性。生物体一切具有其种属特异性的特征,均可作为标记。DNA分子标记是DNA分子中能够反映生物种属特异性的序列特征,这种特征可以用多种方法揭示。 2、DNA分子标记的种类有哪些? DNA分子标记有:限制性长度多态性RFLP、PCR-RFLP、CAPS、DNA指纹、随机扩增多态性RAPD、序列特征扩增区SCAR、位点特异性PCR(AS-PCR)、单链构象多态性SSCP、扩增片段长度多态性AFLP、序列分析、单核苷酸多态性SNP、表达序列标签EST、序列标签位点STS、简单序列重复SSR、简单序列长度多态性SSLP、微卫星序列DNA、VNTR等。 3、DNA分子标记有哪些用途? 在基因组研究中的作图; 动植物遗传育种中的应用; 医学遗传学和疾病的诊断; 传染病的病原生物检测:如SARS,禽流感病毒; 生物样品的检验如海关检疫、法医鉴定、中药材鉴定等; 在动物学研究中的应用。 4、简要说明RFLP的原理并举例说明其应用。 RFLP的原理是限制性内切酶(II型酶)对特定序列的识别,并在识别位点专一性地将双链DNA切开。多数限制性内切酶识别的是DNA分子中4~6 bp的特征序列,而基因组DNA分子中散布着多种内切酶的识别序列,故可将不同生物的DNA分子切成长短不一的DAN片段。每4nbp处有一切点,理论上切点的频率为基因组总长/ 4n bp,因此对某一特定基因组,识别位点碱基数多的限制酶,在该基因组中的识别位点数就少;反之就多。切点的多少可由酶切后的DNA片段长度检验。可以应用于物种遗传多样性分析。 5、举例说明DNA分子标记在动物学研究中的应用。 DNA分子标记在动物学研究中的应用包括估算遗传距离、重建系统发生树、分析种群结构及分子生态学、测定种群遗传多样性及应用于保护生物学、系统地理学、鉴定物种或种群等。 例:厦门海域文昌鱼的研究:通过设计Cytb和12S rRNA基因扩增引物,PCR扩增,测序和序列比对、MEGA数据分析,得出结论厦门有2种文昌鱼,二者的遗传距离达到21.13%;其中有一种(来自黄厝)与来自日本海域的文昌鱼的遗传距离只有0.56%;详细的观察、测量与比较,进一步确定其作为2个不同的物种在厦门海域的存在。 6、名词解释 随机扩增多态性RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA):根据在庞大的基因组DNA中存在的许多短的颠倒重复序列。用单一引物,在较低的复性温度下,可以将基因组中两个相邻的颠倒重复序列间的DNA片段扩增出。通过琼脂糖凝胶电泳等分离手段,可将扩增产物按片段大小分离,形成特定的电泳谱带。 单链构象多态性SSCP(Single Strand Conformational Polymorphism):DNA单链在变性凝胶电泳中的迁移速率不仅与DNA片断长度有关,还与特定序列形成的特定空间构象有关。 扩增片段长度多态性AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism):用限制酶切基因组DNA后,装上适当接头,再用选择性引物扩增,可得到长度多态性很好的DNA片段。 表达序列标签EST(Expressed Sequence Tag):从一个随机选择的cDNA 克隆进行5’端和3’端测序获得短的cDNA 部分序列代表一个完整基因的一小部分也能说明该组织中各基因的表达水平。(Single Nucleotide Polymorphism):基于同一位点不同等位基因存在不同单核苷酸的现象发展出的DNA分子标记技术,目前已有一些新的检测SNP的方法,对于高通量的SNP检测,最有希望的是用DNA芯片技术。 简单序列重复SSR(Simple Sequence Repeat)或Microsatellite DNA:基因组上存在大量的、具有丰富多态性的微卫星DNA,这种简单重复序列可以作为分子标记。 刘广发老师(7题) 1、什么是干细胞? 干细胞是动物(包括人)胚胎及某些器官中具有自我复制和多向分化潜能的原始细胞,能分裂、产生出表现型和基因型都和自己完全相同的子细胞,同时还能分化为各类祖细胞,是重建、修复病损或衰老组织、器官功能的理想种子细胞。 2、干细胞的特征? 具有无限增殖分裂的能力;长期保持自我稳定的能力;长期保持分化成其它细胞的可能性;产生新细胞是对组织(细胞)损伤的反应;以对称和/或不对称两种方式进行生长:或保持不分化状态,或不可逆地走向终末分化(由细胞质中调节分化蛋白不均匀分配决定)。 3、干细胞的分类? 干细胞分为全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞(专能干细胞)。但是有些干细胞是可塑的,一种成体干细胞在一定条件下可以产生出其它的细胞和组织。 4、
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