生物选修一 5-3 血红蛋白的提取和分离课件.pptVIP

相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的进行过程可表示为图中哪一个 教学反馈 1．凝胶色谱法是根据（ ）分离蛋白质的有效方法。 A分子的大小 B相对分子质量的大小 C带电荷的多少 D溶解度 2．缓冲液的作用是：在一定范围内，抵制外界的影响来维持（ ）基本不变。 A温度 B pH C渗透压 D氧气浓度 3．电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷（ ）的电极移动。 A相同 B相反 C相对 D相向 4、使用SDS-聚丙烯酰胺电泳过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于（ ） A 电荷的多少 B 分子的大小 C 肽链的多少 D 分子形状的差异 5．血液由血浆和各种血细胞组成，其中（ ）的含量最多。 A白细胞 B血小板 C红细胞 D淋巴细胞 6．为防止血液凝固，在采血容器中要预先加入抗凝血剂（ ）。 A. NaCl B.甲苯 C.蒸馏水 D.柠檬酸钠 7．将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为4层，其中第3层是（ ） A无色透明的甲苯层 B脂溶性物质的沉淀层 C血红蛋白的水溶液 D其他杂质的暗红色沉淀物 在装填凝胶柱时，不能有气泡存在的原因是 A、气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次 序，降低分离效果 B、气泡阻碍蛋白质的运动 C、气泡与蛋白质发生化学反应 D、气泡在装填凝胶的时候，使凝胶不紧密 样品的加入和洗脱的操作不正确的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 A． 加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面 B．加样后，打开下端出口，使样品渗入凝胶床内 C．等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口 D．用吸管小心的将1ml透析后的样品加到色谱柱的顶端，不要破坏凝胶面 下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作，其中正确的是（ ） A．可采集猪血作为实验材料 B．用蒸馏水重复洗涤红细胞 C．血红蛋白释放后应低速短时间离心 D．洗脱液接近色谱柱底端时开始收集流出液 * 一. 蛋白质分离和提取的原理 分子的形状、大小 电荷性质和多少 溶解度 吸附性质 对其他分子亲和力 根据蛋白质各种特性的差异： （一）凝胶色谱法 2）材料：凝胶 (分配色谱法) 1）概念 根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法 凝胶是微小的多孔性球体，如葡聚糖或琼脂糖。内部有许多贯穿的通道。 大分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快； 小分子穿过多孔凝胶颗粒的内部，路程长，流动慢。 B 抵制外界酸碱对溶液pH的干扰而维持 pH稳定。 （二）缓冲溶液 （三）电泳 1)概念 带电粒子在电场作用下发生迁移的过程 2)原理 利用了待分离样品中各分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。 3)类型: 琼脂糖凝胶电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳 4)实例： SDS——聚丙烯酰胺凝胶电泳 用途: 测定蛋白质的分子量 鉴定蛋白质的纯度 5)原理： SDS能与各种蛋白质形成蛋白质—SDS复合物，SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有电荷量。使电泳迁移速率完全取决于分子的大小。 血液组成成分 血液由______和________两部分组成。 血细胞中________细胞数量最多，细胞的含量最高的化合物是__________。 该化合物是由 _________和 __________构成的，其中每 个亚基中都含有一个能与O2和 CO2结合的___________基团。 血浆 血细胞 红细胞 血红蛋白 2条α-肽链 2条β-肽链 亚铁血红素 本课题可选用猪、牛、