河北北方学院临床免疫学检验考试重点.docVIP

临床免疫学检验 老师给的重点，自己总结的，可能有些错误，当复习资料看看吧。是手打的，有些错字漏字请见谅吧。 绪论 临床免疫学检验是研究免疫学检验的理论、技术、应用，以及临床免疫学性疾病发病机制、免疫诊断与防治的一门医学应用性学科。 临床免疫学（clinical immunology）是利用免疫学的基础理论和技术来研究临床疾病的免疫病理机制、诊断和鉴别诊断、治疗效果和预后判断以及疾病预防等多个分支学科的总称。 免疫学检验建立的基础 抗原抗体反应 抗原抗体反应（antigen-antibody）是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。可发生于体内，也可发生于体外。 抗原抗体防御的原理是什么？具有哪些特点？ 原理：基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性，抗原与抗体间的结合是非共价键结合，通过静电场力、范德华引力（作用最小）、氢键结合力（最具特异性）、疏水作用力（作用最大）等分子间的引力结合在一起，在特异性的基础上形成非共价键由亲水胶体转化为疏水胶体。特点：特异性、比例性、可逆性。 影响抗原抗体反应的因素有哪些？ ①反应物自身因素 抗原（理化性状、分子量、表位的种类和数目）、抗体（来源、浓度、特异性与亲和力）。②环境因素 电解质、酸碱度（一般在6-8之间为宜）、温度（一般为15-40，常用抗原抗体反应为37）。③对照的设置 阴性对照、阳性对照、空白对照、标准品对照 亲合力（avidity）：抗体结合部位与抗原表位之间结合的强度，与抗体结合价直接相关即所谓多价优势。 亲和力（affinity):是指抗体分子单一抗原结合部位与抗原分子表面一个相应抗原决定簇（表位）之间的结合强度，它是抗原抗体之间固有的结合力。 免疫原和抗体的制备 抗体制备类型：单克隆抗体、多克隆抗体、基因工程技术。 各类抗体的制备原理和应用？ 单克隆抗体，原理： 将抗原免疫的小鼠脾细胞与具有体外长期繁殖能力的小鼠骨髓瘤细胞通过融合剂（聚乙二醇，PEG）融为一体，在HAT选择性培养基的作用下，只让融合成功的杂交瘤细胞生长，经过反复的免疫学检测、筛选和单个细胞培养（克隆化），最终获得既能产生所需单克隆抗体，又能体外长期繁殖的杂交瘤细胞系，将这种杂交瘤细胞扩大培养，接种于小鼠腹腔，从小鼠腹腔积液中获取高效价的单克隆抗体。 应用：　1．检验医学诊断试剂。作为检验医学实验室的诊断试剂，单克隆抗体以其特异性强、纯度高、均一性好等优点，广泛应用于酶联免疫吸附试验、放射免疫分析、免疫组化和流式细胞仪等技术。并且单克隆抗体的应用，很大程度上促进了商品化试剂盒的发展2．蛋白质的提纯，单克隆抗体是亲和层析中重要的配体。3． 肿瘤的导向治疗和放射免疫显像技术，将针对某一肿瘤抗原的单克隆抗体与化疗药物或放疗物质连接，利用单克隆抗体的导向作用，将药物或放疗物质携带至靶器官，直接杀伤靶细胞，称为肿瘤导向治疗。另外，将放射性标记物与单克隆抗体连接，注入患者体内可进行放射免疫显像，协助肿瘤的诊断。 多克隆抗体，原理:抗原通常是由多个抗原决定簇组成的，由多种抗原决定簇刺激机体，相应地就产生各种各样的单克隆抗体，这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体，机体内所产生的抗体就是多克隆抗体；除了抗原决定簇的多样性以外，同样一类抗原决定簇，也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。即使是同一个抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。当将抗原注射入实验动物体内时，一系列抗体生成细胞会不同程度的与抗原结合，受抗原刺激后在血液中产生不同类型的抗体，这种由一种抗原刺激产生的抗体称为多克隆抗体。多克隆抗体中不同的抗体分子可以以不同的亲和能力与抗原分子表面不同的部分—抗原决定簇相结合。 将抗原导入敏感动物体内后，可刺激网状内皮细胞系统，尤其是淋巴结和脾脏中的淋巴细胞大量增殖。通常初次免疫应答往往比较弱，尤其是针对于易代谢，可溶性的抗原。首次注射后大约7天，在血清中可以观察到抗体但抗体的浓度维持在一个较低的水平，在大约10天左右抗体的滴度会达到最大值。但同种抗原注射而产生的二次免疫应答的结果明显不同，和初次免疫应答相比抗体的合成速度明显增加并且保留时间也长。免疫应答的动力学结果取决于抗原和免疫动物的种类，但初次和二次免疫应答之间的关系是免疫应答的一个重要特点。三次或以后的抗原注射所产生的应答和二次应答结果相似：抗体的滴度明显增加并且血清中抗体的种类和性质发生了改变，这种改变被称为免疫应答的成熟，具有重要的实际意义。通常在抗原注射4-6周后会产生具有高亲和力的抗体。 基因工程抗体应用DNA重组及蛋白工程技术对编码抗体基因按不同需要进行改造和装配，导入适当的受体细胞后重新表达的抗体基因工程（genetic engineering）又称