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第七节 骨 髓 检 查 学习要点 1.概念 粒/红比值、非红系百分比、骨髓稀释、细胞化学染色、造血干细胞、造血祖细胞 2.骨髓检查适应证、骨髓细胞形态学检查、正常骨髓象特征以及骨髓增生程度分级和标准 3.血细胞免疫标记技术及分子生物学技术在血液系统疾病中的临床应用 4.血细胞染色体的常规显带技术种类及其在血液系统疾病中的临床应用 5.常见细胞化学染色及其临床意义 一、骨髓常规检查 （一）临床应用 （二）骨髓穿刺术 （三）骨髓片检查 （四）大致正常骨髓象 （一）临床应用 1.诊断或协助诊断血液系统疾病 可以确诊的疾病包括各种白血病、再生障碍性贫血、巨幼细胞性贫血、尼曼-匹克病、戈谢病、多发性骨髓瘤、骨髓转移癌等； 协助诊断的包括缺铁性贫血、溶血性贫血、特发性血小板减少性紫癜、恶性淋巴瘤骨髓浸润、骨髓增生异常综合征等，并可提高某些疾病的诊断率如疟疾、黑热病等； 2.血液系统疾病的疗效观察及病情判断，通过复查可作出骨髓完全缓解、部分缓解、改善、复发等意见。 适应证 1.血象检查中有不明原因的某种血细胞过多或过少，或出现幼稚细胞。 2.不明原因的肝、脾或淋巴结肿大 3.不明原因的发热、紫癜、骨痛、恶病质 4.疑有其他恶性肿瘤有骨髓内转移 5.肾功能异常、血沉明显增加或有异常蛋白血症和异常蛋白尿症 6.血液系统疾病定期复查、化疗后的疗效观察 7.其他：骨髓活检、细胞表面抗原测定、造血干/祖细胞培养、血细胞染色体核型分析以及微生物培养、寄生虫学检查（如疟疾、黑热病）等 禁忌证 1.由于凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病 ：血友病 2.妊娠晚期的妇女不宜做骨穿，若高度怀疑恶性病者可行骨髓穿刺，同时应终止妊娠。 3.穿刺部位有炎症或畸形应避开 （二）标本的采集、制片、染色 1.骨髓穿刺部位选择： ①骨髓腔中红骨髓丰富； ②穿刺部位浅表、易定位； ③应避开重要脏器。 常见穿刺部位：髂骨、胸骨、脊突、胫骨粗隆 首选穿刺部位：髂后或髂前上棘 2.骨髓制片注意事项 骨髓易凝（不宜抗凝），取材后应立即涂片，并尽快送检，保证细胞在新鲜状态下染色。 取玻片上骨髓小粒丰富的骨髓液来制片 推片时角度应小一些，速度应慢一些，避免血膜过厚。 推片时应注意保留片尾和边缘，以防大体积细胞丢失。 涂片后应立即扇干，以防细胞皱缩变形。 初诊病人骨髓推片以10张为好，且全部送检同时应送检血片（不少于3张）和简单病历一份。 对于非技术因素而多部位穿刺均抽不出骨髓者即为干抽，常见于骨髓纤维化症，骨髓极度增生或增生极度减低，肿瘤骨髓浸润等，可进行骨髓组织病理检查。 3.骨髓取材情况判断 （1）骨髓穿刺取材满意的指征 抽吸骨髓时病人有特殊酸痛感 ； 可见较多骨髓小粒和脂肪滴（与血片区别）； 镜检可见大量有核细胞，同时可发现骨髓特有细胞：巨核C、浆C、组织C等 镜检粒细胞杆状核多于分叶核。 3.骨髓取材情况判断 （2）骨髓稀释 完全稀释：是指抽出的“骨髓液”实际上与外周血一样，骨髓成分少或无。肉眼观察，其“骨髓液”较稀、无黄色小粒；推片尾部无骨髓小粒。 部分稀释：指抽吸骨髓液时混进较多血窦血。 特征包括： ①骨髓小粒无或少见； ②有核细胞减少，且分布不匀，明显呈条状分布； ③骨髓特有细胞少； ④中性分叶核粒细胞和成熟淋巴细胞比例增加。 4.染色方法 （1）Wright染色： （2）Wight-Giemsa染色： ①染液配制：Ⅰ液是将瑞特染粉1g、姬姆萨染粉0.3 g加入到500ml甲醇瓶中配制而成，Ⅱ液为Wright染色中的磷酸盐缓冲液； ②染色步骤同瑞特染色。 （3）国际标准化委员会推荐的罗曼诺夫斯基染色： ①染液配制：Ⅰ液由美蓝9.0mg、天青B17.0mg及伊红13.0mg溶解于20ml1:1甘油甲醇中配制而成，Ⅱ液：0.00132M的sorensen磷酸盐缓冲液（pH6.4～6.8） ②染色步骤：涂片固定后，上述Ⅰ液用100mlⅡ液稀释后，染色10min后冲洗，待检。 瑞氏染色结果分析 （三）骨髓检查 1.低倍镜检查 了解骨髓的取材、涂片及染色情况，选择合适的部位用于有核细胞分类计数 判断骨髓有核细胞增生程度：选择细胞分布适中的部位进行，以骨髓中有核细胞与成熟红细胞之比判断 观察巨核细胞分布情况，重点在尾部和边缘 ，并计数全片巨核细胞数量 注意观察骨髓片边缘及尾部是否存在体积特大或成堆出现的特殊病理细胞。 骨髓有核细胞增生程度五级判断标准 增生程度 有核细胞/成熟红 有核细胞/HP 常见病例 增生极度活跃 1:1 ﹥100