血液分析仪及其临床应用分解.ppt

血液分析仪及其临床应用 讲授主要内容如下：见教材（P50-72） 1 检测原理 2 检测参数 3 细胞直方图 4 方法学评价 5 临床应用 6 血液分析仪使用中应注意的问题 血液分析仪1 血液分析仪2 血液分析仪3(动物血) COULTER ：全自动细胞分析仪 COULTER ：细胞分析仪 库尔特基金会提供的相片1 库尔特基金会提供的相片2 血液分析仪发明者库尔特先生 库尔特与李俊的差别:社会价值观的差别 一 血液分析仪检测原理 血液分析仪检测原理大致分为两类： ①电阻抗法（库尔特原理） ②光散射法 （其中电阻抗法是血液分析仪的设计基础） 血液分析仪主要能完成两大功能： ①细胞计数功能 ②细胞分类功能 检测原理主要内容 1 电阻抗法原理（库尔特原理） 库尔特原理与原理图 仪器的主要组成 白细胞检测原理 红细胞检测原理 血小板检测原理 血红蛋白检测原理 2 VCS法原理 （一） 电阻抗法原理（库尔特原理） 1 库尔特原理 库尔特原理是利用电阻抗法测量 细胞的数量和体积。其内容为：血细 胞是电的不良导体，当一个细胞通过 计数小孔时，会导致小孔两端电阻的 变化，将其转化成脉冲，感应器通过 检测脉冲的数量及大小，从而计算出 通过小孔的细胞数量及体积。 2 库尔特原理图 3 电阻抗法仪器的主要组成 电阻抗法仪器的主要组成包括： 信号发生器（脉冲检测器） 放大器（微伏放大为伏级的脉冲信号） 阈值调节（计数不同细胞有不同阈值） 甄别器（除去假脉冲信号） 整形器（波形调整为标准一致的平顶波） 计数系统（不同脉冲区分出不同细胞并计数） 4 白细胞检测原理 根据电阻抗的原理，不同体积白细胞(35-450)fL产生脉冲大小的明显差异而区分相应的三群细胞： 6 电阻抗法红细胞检测原理 电阻抗法检测红细胞要注意白细胞增高干扰： 稀释血液中含有白细胞，当血液进入红细胞 检测通道时，红细胞检测的各项参数中均含 有白细胞因素。正常时，血液红细胞与白细 胞的比例约为500：1～750：l，因此，白细 胞因素可忽略不计。 当病理情况下，如白血病时，白细胞数明显 增高，同时又伴有贫血时，使所得红细胞参 数可产生明显误差。 7 红细胞其他参数的检测 MCV 4.HCT MCH 5.MCV MCHC 6.RDW 8 血红蛋白测定原理 9 有关溶血剂 ICSH推荐的HICN法：最大吸收峰在 540nm。血红蛋白衍生物是HICH-HB， 试剂反应时间长，5分钟，不适合 全自动仪器。另外，氰化血红蛋白 （CN-HB）：试剂成分氰化钾（剧毒）。 2 非氰化溶血剂（如SDS-HB）： SDS-HB与HICH-HB吸收光谱相似。 10 血小板检测原理 根据电阻抗法，血小板随红细胞在一 个系统中进行检测，在红细胞／血小板计 数池中计数2fl～30fl的颗粒。 有些仪器专门设置了增加血小板准确 性的技术，如鞘流技术、浮动界标、拟合 曲线等。 11 PLT拟合曲线 仪器进行血小板计数时，计数2fl 一30fl大小的血小板颗粒数量，再拟合 出一条0fl一70fl的曲线，将小部分小 血小板及大血小板包含进去，但拟合曲 线的给出是有条件的，条件不满足时仪 器不能给出拟合曲线。 12 血小板拟合曲线的条件 1．血小板计数20X109/L 2．直方图呈现对数正态分布 3．直方图的峰值在2一15fl范围 4．PDW20％ （二）光散射法血液分析仪检测原理 光散射法组合应用电学、光学、细胞化学 多项技术检测血液细胞，可得出较准确的 细胞计数和分类计数的结果。 这些测试原理的改进主要体现在对白细胞 分类部分的改进，即电阻抗法的白细胞三分 群发展为多项技术对白细胞五分类。 1 光散射法测试原理改进的四种类型 激光与细胞化学法 容量、电导、光散射（VCS）法 电阻抗与射频法 多角度偏振光散射法 3 VCS法原理 1 应用电阻抗原理测量细胞体积(Volume，V) 技术。 2 应用电导性（Conductivity C）技术。 检测的原理是：根据细胞壁能产生高频 电流的性能，采用高频电磁探针，测量 细胞内部结构，即以细胞核和细胞质的 比例、细胞内颗粒的大小和密度，来辨 别体积