矿质元素对植物的作用(2012级)答案.pptVIP

综合实验1 矿质元素对植物的作用 一、实验教学目的 熟练掌握植物的溶液培养法(或沙基培养法); 熟悉植物主要营养元素缺乏症的典型症状; 掌握植物体内硝态氮、硝酸还原酶活性的测定方法； 比较不同条件(N素、光照、还原糖等)对硝酸还原酶的诱导作用。 综合实验1 矿质元素对植物的作用 二、实验意义 (一）硝酸还原酶活性的测定 硝酸还原酶(NR)是硝酸盐同化中第一个酶，也是限速酶，处于植物氮代谢的关键位置。它与植物吸收利用氮肥有关，对农作物产量和品质有重要影响，因而硝酸还原酶活性被当作植物营养或农田施肥的指标之一，也可作为品种选育的指标之一。 综合实验1 矿质元素对植物的作用 二、实验意义 （二）植物体内硝态氮含量的测定 1、植物体内硝态氮含量可反映土壤氮素供应情况，常作为施肥指标。 2、蔬菜类作物特别是叶菜和根菜中常含有大量硝酸盐，在烹调和腌制中可转化为亚硝酸盐而危害健康，故硝酸盐含量又成为蔬菜及其加工品的重要品质指标。 综合实验1 矿质元素对植物的作用 三、实验基本原理 (一）硝酸还原酶活性的测定 硝酸还原酶是一种诱导酶，受到NO3-的诱导，在未供应NO3-之前，细胞中不存在已合成的硝酸还原酶，也找不到编码这种蛋白的mRNA。当供给NO3-数小时后，即有硝酸还原酶的合成。 此外，光照、还原性糖以及叶绿体正常功能等也是诱导植物NR mRNA基因表达的重要影响因素。 综合实验1 矿质元素对植物的作用 三、实验基本原理 (一）硝酸还原酶活性的测定 采用真空渗入法使NO3-进入植物组织，并在硝酸还原酶作用下还原为NO2-，产生的亚硝态氮在酸性溶液中与对-氨基苯磺酸形成重氮盐，再与α-萘胺定量生成红色偶氮化合物，生成的红色偶氮化合物在520nm有最大吸收峰，可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示。 综合实验1 矿质元素对植物的作用 综合实验1 矿质元素对植物的作用 三、实验基本原理 （二）植物体内硝态氮含量的测定 在酸性条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，生成的硝基水杨酸在碱性条件下（pH＞12）呈黄色，最大吸收波长为410nm，在一定范围内，其颜色的深浅与含量成正比，可直接比色测定。该方法测定硝态氮含量十分稳定可靠。 综合实验1 矿质元素对植物的作用 四、仪器试剂 （一）硝酸还原酶活性的测定（309实验室） 1、实验组 玻璃仪器：(1)50ml三角瓶4个　(2)试管4根　(3)打孔器2个　(4)玻棒2根　(5)移液管7根 试剂：(1)PH7.5磷酸缓冲液　(2)0.2molKNO3 (3)1% (w/v)磺胺　(4) 1% (w/v)α-萘胺　(5) 蒸馏水 综合实验1 矿质元素对植物的作用 四、仪器试剂 （一）硝酸还原酶活性的测定（309实验室） 2、标准曲线组 玻璃仪器： (1)试管7根 　(2) 移液管5根　 试剂： (1)1% (w/v)磺胺　 (2) 1% (w/v)α-萘胺　 (3) 蒸馏水　(4) 5ug/mlNaNO2 综合实验1 矿质元素对植物的作用 四、仪器试剂 （二）植物体内硝态氮含量的测定（310实验室） 1、实验组 玻璃仪器：(1)试管4根　(2)烧杯和漓管　(3)25ml容量瓶2个　 (4) 漏斗2个　(5) 弯颈漏斗2个(6)玻棒2 根　(7) 移液管5根 试剂：(1) 5% 水杨酸－硫酸溶液　(2) 8% NaOH水溶液 (3) 蒸馏水 综合实验1 矿质元素对植物的作用 四、仪器试剂 （二）植物体内硝态氮含量的测定（310实验室） 2、标准曲线组 玻璃仪器：(1)50 ml容量瓶8个　(2) 试管9根　(3) 移液管8根 试剂：(1) 5% 水杨酸－硫酸溶液　(2) 8% NaOH水溶液 (3) 蒸馏水　(4)500mg／L KNO3 综合实验1 矿质元素对植物的作用 五、实验材料 1、小麦、玉米、棉花、蓖麻、烟草、向日葵等农作物叶片或叶柄； 2、黄瓜、茄子、辣椒、豆角、大白菜、萝卜等蔬菜绿叶、心叶、菜心、菜帮等； 3、八仙花、红叶石楠、木芙蓉、紫荆、珊瑚树等园林植物叶片或叶柄； 4、枫香、木荷、梧桐、泡桐等林木叶片或叶柄。 综合实验1 矿质元素对植物的作用 六、实验设计 1、比较不同N素形式(NO3-、NH4+、尿素)对NR活性的诱导作用及植物体内硝态氮含量的影响； 2、探讨光照、温度、pH对NR活性的影响； 3、不同种类还原糖对NR活性的影响； 4、不同植物NR活性及硝态氮含量的差异； 5、同一植物不同器官或不同生长时期NR活性及硝态氮含量的差异； 6、探讨不同土壤条件下硝态氮含量的差异。 综合实验1 矿质元素对植物的作用（2013年5月14上午） 综合实验1 矿质