06芳酸及其酯类药物的分析分析.ppt

（二）离子交换-紫外分光光度法 氯贝丁酯及其制剂 USP(2005)采用酸碱滴定法。含有酸性杂质对氯酚时，可采用强碱性阴离子交换树脂吸附酸性杂质后紫外测定（USP（29）） 阴离子交换树脂是在分子中含有碱性基团的离子交换树脂。在水或极性溶剂中能溶胀,在水中具有碱性,能以其氢氧根离子或非金属离子交换溶液中的阴离子。 含有氢氧根离子的树脂,根据电离常数的大小,可分为强碱性、中等碱性和弱碱性三类。 强碱性阴离子交换树脂,主要是分子中含有季铵基-N(CH?)3OH的树脂。弱碱性阴离子交换树脂,有间苯二胺-甲醛树脂、三聚氰胺-胍·甲醛树脂等。 （三）柱分配色谱-紫外分光光度法 USP(29)采用此法同时测定ASA胶囊中 ASA和SA。 1. SA的限量测定 色谱柱的制备；对照品溶液的制备；供试 品溶液的制备。 供试品液：CHCl3液 洗脱液1：CHCl3 洗脱液2：HAC- 乙醚 硅藻土，FeCl3-尿素 玻璃棉 硅藻土，Na2CO3 供试品液：CHCl3-HCl液 洗脱液1：HAC-CHCl3 (1:10) 10ml 洗脱液2：HAC- CHCl3 (1:100) 85ml 1-杂质先洗脱 2-SA后洗脱 ?max=306nm Au＜As 1-杂质先洗脱 2-ASA后洗脱 ?max=280nm ASA(mg)=C(Au/As) 2. ASA的含量测定 色谱柱的制备；对照品溶液的制备；供试品溶液的制备。 Ch.P(2005)ASA的胶囊剂的含量测定采用此法。 USP（24）ASA片、对氨基水杨酸钠、甲芬那酸、布洛芬、丙磺舒等及其制剂，采用此法。 五、HPLC法 一、血清中ASA和SA浓度的HPLC法 色谱条件：色谱柱为ODS-C18(150mm × 4.6mm, 5μm) 流动相为甲醇-水-正丁醇(30 :20 :1) 检测波长为237nm；内标物为苯甲酸。 血清样品预处理 血清100 μl + HClO450 μl + 不同浓度ASA和SA + 内标液 涡旋混合2min 离心5min 取上清液20 μl进样。 第五节 体内药物分析 回归方程：以峰高比（H标/H内）对浓度回归 ASA的回归方程：Y = 5.8×10-3 + 5.29×10-2X r = 0.9996 SA的回归方程：Y = 6.0×10-3 + 8.33×10-2X r = 0.9981 ASA和SA的线性范围分别为：1～20 μg/ml; 2～30 μg/ml 回收率：空白血清 + 五种不同浓度测定，ASA为96.0%～106.0%; SA为92.0%～119.5%;（五种不同浓度均应在线性范围内） 色谱条件：色谱柱为LiChrospher100RP(125mm×4mm, 5μm) 流动相为25%乙腈溶液-醋酸缓冲溶液梯度洗脱。 检测波长为254nm；内标物为依他尼酸。 尿样品预处理：C8固相萃取柱，100mg填料/ml用甲醇1.0ml,然后 用0.5ml蒸馏水活化。 2.0ml尿样 + 内标300μl(10μg/ml) 上柱 1.0ml水洗 脱生物杂质 再用甲醇0.5ml洗脱保留在柱上的丙磺舒和内 标。洗脱液0.45μm浸滤膜滤过，取5μl直接进样分析。 二、尿中丙磺舒的固相萃取净化-HPLC法(运动员违禁药物) 线性关系和回收率： 取空白尿样2.0ml +不同浓度丙磺舒+内标液 按上述方法 分析(浓度范围为0.1μg/ml ～100μg/ml) ;A丙/A内对C丙回归。 回收率：丙磺舒为100%±3%(n=14)；内标为101%±3%(n=12)； 人尿样测定：丙磺舒(单剂量500mg)尿排泄药-时曲线(见P136) 三、HPLC法测定人血浆中布洛芬含量 色谱条件：色谱柱为Shim-packCLC-ODS(150mm×6mm, 10μm) 预柱为YWG-C18；流动相为甲醇-20mol/L磷酸二氢