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微生物 摘 要：目前工业发酵生产 L-苯丙氨酸的菌株均是由大肠杆菌产生的，随着近年来 L-苯丙氨市场需求量的增长，使得快速选育高产量遗传稳定性强的新型基因工程菌显得尤其重要。随着基因工程技术和分子生物学手段的不断发展，以及对微生物芳香族氨基酸代谢途径的进一步了解，L-苯丙氨酸生产菌株的选育已经由原来的随机诱变筛选进入到分子育种阶段。本文综述了L-苯丙氨酸基因工程菌的分子育种研究进展。 作者：郑忠巧 专业及班级：生物工程一班 学 L-苯丙氨酸基因工程菌的分子育种研究进展 XXX 生物工程一班 生命科学学院 XXX大学 哈尔滨 150080 摘 要：目前工业发酵生产 L-苯丙氨酸的菌株均是由大肠杆菌产生的，随着近年来 L-苯丙氨市场需求量的增长，使得快速选育高产量遗传稳定性强的新型基因工程菌显得尤其重要。随着基因工程技术和分子生物学手段的不断发展，以及对微生物芳香族氨基酸代谢途径的进一步了解，L-苯丙氨酸生产菌株的选育已经由原来的随机诱变筛选进入到分子育种阶段。本文综述了L-苯丙氨酸基因工程菌的分子育种研究进展。 关键词：L-苯丙氨酸；大肠杆菌；分子育种；基因敲除 L - phenylalanine Molecular Breeding Research Progress of Genetic Engineering Bacteria ZhengZhongqiao The first class of Biotechnology, College of Life Science, Heilongjiang University, Harbin, 150080 Abstract: The industrial production of L - phenylalanine fermentation strains are produced by escherichia coli, in recent years as L - styrene acrylic ammonia the growth of the market demand, make fast breeding high yield genetic stability new genetic engineering bacteria is especially important. As genetic engineering technology and the continuous development of molecular biology methods, as well as the further understanding of microbial aromatic amino acid metabolism pathway, L - phenylalanine the breeding of production strain by the original random mutagenesis screening entered the stage of molecular breeding. This paper reviews the L - phenylalanine molecular breeding research progress of genetic engineering bacteria. Key words：L - phenylalanine; E.coli; Molecular breeding.; Gene knockout L-苯丙氨酸是一种必需氨基酸，人和动物不能在体内自行合成，必须从外界摄取。L-苯丙氨酸商品化生产随着氨基酸大输液的发展，尤其是低热量的二肽甜味剂的迅速发展而急剧增加，而应用基因工程手段构建基因工程菌的微生物发酵法成为 L-苯丙氨酸生产企业的主要生产手段。大肠杆菌作为 L-苯丙氨酸发酵生产的宿主菌，其菌株选育种及分子改造一直是活跃的领域。传统的菌株改良主要是使用有效的化学或放射线随机诱导菌种突变以提高菌株的抗生素产量，或者用天然杂交或原生质体融合技术从突变筛选系的分支处组合预期基因以得到高产量的菌株。虽然很多传统选育方法都取得一定的成功，但这些方法到目前为止还没有令人满意的描述。另外，这些方法主要对低产原始菌株产量的提高比较有效，而对高产菌株的进一步提高就必须采取新技术或新手段。随着基因工程和分子生物学技术的不断发展,对大肠杆菌芳香族代谢机制的了解，L-苯丙氨酸基因工程菌的分子育种孕育而生。 1 .分子育种及其优势 分子育种，1994 年由美国学者 Stemmer正式提出。即通过基因工程技术定向构建一个或多个基因的突变体，并从中筛选能够表达