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GPC操作步骤 操作前准备 标样及样品的配制 在分析前一天称好一定重量的标样和样品，置于样品瓶中，加入流动相，室温放置12-24小时。通常将2个相差大的分子量标样配在一起。一般校准曲线有8个不同分子量，总共4个标样。 使用前缓慢水平摇动样品瓶，使样品浓度均匀，且瓶壁无气泡。 提示：配制标样应该严格按照标样的说明书来操作。严禁超声和加热。标样的浓度应该选在合适的范围，通常根据分子量来确定。标样的有效期请参考说明书。 流动相的准备 使用色谱纯级溶剂和超纯水来配制流动相。0.45um滤膜过滤后，超声脱气。 提示：超声15min，恢复到室温后才可使用。 分析操作步骤 开机及平衡过程 打开空调，使室内温度保持在25℃左右。 打开电脑及仪器（包括输液泵LC-20AD、自动进样器SIL-20A、检测器RID-10A、柱温箱CTO-20A）。 提示：在打开仪器的时候，通常控制器最后开。如果控制器装在输液泵内部，则该输液泵最后开。 运行LCsolution。 双击电脑桌面，打开LCsolution程序，点击第一个图标。 Login窗口点击OK，无密码。 点击“Instrument Parameters View”中“Normal”，设定方法参数。 仪器参数窗口设定方法参数： 流动相流速（pump a flow）：1ml/min 测定时间（time）：大于溶剂峰出峰时间2-3min 柱温（oven temperature）：40℃（与检测器温度相同） 选中Advanced窗口，pump，pressure：max：8mPa（参照柱子说明书，两根柱子串联则相加） 点击Download按钮，出现对话框选择是，将参数下载到仪器。 提示：“Instrument Parameters View”中“Advanced”为各设备的运行参数，参考相关说明书制定。 输液泵排气：逆时针拧开LC-20AD排液阀，按purge按钮，3min后自动结束，顺时针拧紧排气阀。 提示：排液阀拧开不要超过180度，否则反而容易在purge时引入气泡。 进样器冲洗：按自动进样器上purge按钮，25min后自动结束； 提示：自动进样器清洗液使用与流动相相同溶剂，但是去除了添加的盐和酸等物质。 平衡GPC柱：待2.1.5结束后，按（Instrument On/Off）使仪器按照方法参数开始运转，一般60min左右基线可以走平。 提示：可以与2.1.6步同时进行。 示差检测器平衡 按R flow on/off键冲洗参比池。 20min后，按R flow on/off键停止冲洗，反复点击3-4次以消除池内气泡。 调零，等基线平稳后检查balance值，如果大于50，就进行光路平衡，如果小于50，不必进行。 在仪器监视窗口查看检测器能量应处于6000和9000之间，否则在面板上调节电压使之坐落在该范围内。 提示：2.1.8可以在2.1.7步流动相彻底置换色谱柱中溶液后开始进行。 待基线基本稳定，按Zeros Detector A键调零。 分析操作过程 放入样品瓶，记录放置孔号。 提示：样品架应推倒底，瓶垫应该白色朝上。 编辑批处理表 右侧助手烂点击“Batch processing” New； 输入第一个样品进样器孔号（Vial#），右键fill detail； 跳出窗口中依次填入行数（由第1行到第6行）、第一个样品孔号（2）与重复次数（1次）；点击“OK”； 依次输入sample name（样品名）、sample ID（样品编号）； method file列中输入方法文件（*.lcm文件），左键选定列，右键单击，选择fill down向下填充； 确定数据文件保存地址及名称； 输入进样体积：50μl-100μl（标样浓度高则进样量少，低则进样量多；所有的标准品和代测样品应该采用相同的进样体积）； 保存批处理文件。 运行批处理表。点击Batch start按钮，开始进样。 提示：测试过程中可按助手栏中“Pause”暂停，插入样品后保存批处理表，按restart；也可按“Stop” 停止，对话框弹出选择“停止这一针分析”和“停止这个样品表的分析”。 提示：手动进样器点击single start进行单次进样。 分析完冲洗及关机过程 第二天将会再次使用 点击仪器控制栏图标，停止温控。 使流动相以0.5mL/min流速流入填充柱，直至柱温冷却至室温； 点击“intrument on/off” 依次关闭程序、电脑和仪器。 仪器长时间不用 点击仪器控制栏图标，停止温控。 换上保存溶剂，以0.5mL/min流速流入填充柱，时间为3-4倍方法时间，直至柱温