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DNA的生物合成 DNA复制的酶：DNA-pol（依赖DNA的DNA聚合酶/DDDP）。原料为dNTP。 原核生物DNA聚合酶： DNA-pol Ⅰ 小片段:有5——3核酸外切酶活性 校读、修复、填补缺口 大片段（Klenow片段）：有5——3聚合酶活性和3——5核酸外切酶活性 DNA-pol Ⅱ 有5——3聚合酶活性，参与应激状态修复 DNA-pol Ⅲ 真正起催化作用，有5——3聚合酶活性和3——5核酸外切酶活性 真核生物DNA聚合酶： DNA-pol α 起始引发，引物酶活性 DNA-pol β 低保真度的复制 DNA-pol γ 线粒体DNA复制 DNA-pol δ 起主要催化作用，类似于DNA-pol Ⅲ；还有解螺旋酶活性 DNA-pol ε 校读、修复、填补缺口，类似于DNA-pol Ⅰ DNA复制时需要的酶：DnaA（起始点辨认）、DnaB（解螺旋酶）、DnaC（是DnaB的助手）、DnaG（引物酶，催化RNA引物生成）、SSB（单链DNA结合蛋白，稳定已解开的DNA单链)、拓扑异构酶（DNA解螺旋时起理顺作用，断开→连接）。 DNA连接酶需要ATP供能。 拓扑异构酶对DNA分子的作用：解开DNA超螺旋，切断单链DNA，连接3——5磷酸二酯键，改变DNA分子的拓扑构象，理顺DNA链。 引发体组成：DnaB、DnaC、DnaG和DNA的起始复制区域。 冈崎片段的处理（DNA复制过程中的切除修复）：水解（RNA酶）、填补（DNA-pol Ⅰ催化）、连接（DNA连接酶）。 DNA损伤的切除修复：内切酶、外切酶、连接酶、聚合酶。 原核生物DNA复制起始点是oriC，起始点长度长，终止点是ter。 真核生物DNA复制起始点有很多，起始点长度短，可能有蛋白质--DNA复合物参与。终止点为端粒。 端粒富含GT小段（GGGGTTTTGGGGTTTT)，可维持染色体的稳定性和DNA复制的完整性。 端粒酶：由RNA和蛋白质组成，是一种特殊的逆转录酶。 紫外线对DNA的损伤主要是形成嘧啶二聚体。修复时需要光修复酶（UvraA、UvraB），DNA-pol Ⅰ，DNA连接酶，解螺旋酶。 镰形红细胞贫血：点突变（T→A） 地中海贫血：基因重排 着色性干皮病：与DNA修复有缺陷有关 RNA的生物合成 RNA不对称转录的酶：RNA-pol。原料为NTP、Mg2+、Mn2+。 结构基因：能转录出RNA的DNA区段。 全酶：α2ββσ，转录起始辨认起始点（σ亚基的功能）。 核心酶：α2ββ，转录延长阶段只需核心酶。 原核生物RNA合成： RNA-pol 没有校对功能，缺乏3→5外切酶活性 α2 决定哪些基因被转录（因为有2个α。所以可以商量着决定基因转录） β 与NTP结合，形成磷酸二酯键（有两个洞，形象记忆为二酯键） β 与DNA模板结合，开链（β加个小钥匙，用来开链） σ σ的辨认起始点（圆圈的尾巴向上，为起始点，终止点为ρ，圆圈的尾巴向下 真核生物RNA合成： RNA-pol Ⅰ 定位核仁，转录45S-rRNA （个头最大） RNA-pol Ⅱ 定位核浆，转录产生hnRNA→mRNA （最有用） RNA-pol Ⅲ 定位核浆，转录产生tRNA、5S-rRNA、snRNA （细胞中数量最少，个头最大） 利福平能专一性地结合RNA-pol的β亚基，抑制结核杆菌的转录。 对鹅膏蕈碱的敏感性：RNA-pol Ⅱ＞RNA-pol Ⅲ＞RNA-pol Ⅰ 操纵子：包括若干个结构基因及其上游的调控序列。 调控序列中含有启动子，启动子是RNA-pol结合DNA的部位，包括-10区（Pribnow盒，TATAAT序列）、-35区（TTGACA序列，是σ因子识别部位）等。 原核生物的mRNA不需修饰。 真核生物转录起始需要启动子、RNA-pol和转录因子（TF）的参与。 顺式作用元件包括：启动子、启动子上游原件、增强子等。 启动子：核心序列为TATA，称为TATA盒或Hognest盒。 启动子上游原件：是TATA盒上游的DNA序列，常见的是GC盒和CAAT盒。 反式作用元件包括：转录因子（TF）和上游因子。 转录因子：直接或间接结合RNA-pol。 上游因子：结合上游原件。如Sp1结合GC盒，C/EBP结合CAAT盒。 转录起始复合物（PIC）包括：TBP（TFⅡD+TATA盒），TFⅡB，TFⅡA，RNA-pol Ⅱ-TFⅡF复合体，TFⅡE，TFⅡH，DNA。TFⅡA形似三角形，起稳定作用，B是两个人促进结合，B中间的隔阂没了变成D是结合了，E有ATPase的作用，去掉底下的支撑后变成F就是解螺旋了。 转录终止修饰点为AATAAA序列和很多的GT序列。 蛋白质的生物合成 遗传密码 起始密码 AUG