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石榴高级中学０８高三生物一轮复习学案 DNA重组技术的基本工具 班级　　　姓名　　　　　编号0801 课标要求：简述基因工程的原理和技术能力要求：ＤＮＡ重组技术的基本工具（A） 知识网络体系 来源：主要从原核生物中分离 功能：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列， 限制性内切酶 并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷 （分子手术刀） 酸二酯键断开。 切割后的DNA末端： 黏性末端 平末端 功能：将切下来的DNA片段拼接成新的DNA分子 DNA连接酶 T4 DNA连接酶：既能“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端， （分子缝合针） 种类 也能“缝合”双链DNA的平末端 E·coli DNA连接酶：只能将双链片段互补的黏性末端连接 能在宿主细胞中保存下来并大量复制 条件： 有一个至多个限制酶切割点， 基因进入受体细胞的载体 有特殊的遗传标记基因，便于筛选。 （分子运输车） 质粒（常用） 种类： λ噬菌体的衍生物 动植物病毒 重难热点归纳 限制性内切酶的功能: 黏性末端和平末端 DNA连接酶与DNA聚合酶的区别: 载体必须具备的条件: 常用的载体: 例题下图表示限制酶切割某DNA的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是 A．CTTAAG，切点在C和T之间B．CTTAAG，切点在G和A之间 C．，切点在G和A之间D．CTTAAC，切点在C和T之间 ( ) A.大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶 B.噬菌体、质粒、DNA连接酶 C.DNA限制酶、RNA连接酶、质粒 D.DNA限制酶、DNA连接酶、质粒 2．不属于质粒被选为基因运载体的理由是 （ ）　　A．能复制 　　B.有多个限制酶切点 　C．具有标记基因 　 D．它是环状DNA ① ② ③ ④　 A．①②　　　B．②③　　　C．③④　　　D．②④ ４．质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是 ①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构很小 ④蛋白质 ⑤环状RNA ⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居” A．①③⑤⑦ B．①④⑥C．①③⑥⑦ D．②③⑥⑦．有关基因工程的叙述中，错误的是 　　A．DNA连接酶将黏性未端的碱基对连接起来　B．限制性内切酶用于目的基因的获得　　C目的基因须由载体导入受体细胞　D．人工合成目的基因不用限制性内切酶．实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限性内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA子中的GAATTC顺序，切点在G和A之间，这是应用了酶的（　）　　A．高效性 　　B.专一性　　C．多样性 　　D.催化活性受外界条件影响 A . 提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B. 有利于对目的基因是否导入进行检测 C. 增加质粒分子的分子量 D．便于与外源基因连接 ８．在重组DNA技术中，不常用到的酶是 　　A、限制性内切酶??B、DNA聚合酶　C、DNA连接酶??????? D、反转录酶 多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为 　　A、平头末端?? B、3突出末端?? C、5突出末端?? D、