液相色谱仪不确定度评定.docVIP

液相色谱仪最小检测浓度的测量不确定度评估 测量方法（依据JJG 705--2002） 液相色谱仪依据国家计量检定规程JJG705—2002《液相色谱仪》进行检定，其中紫外-可见光检测器、二极管阵列检测器，荧光检测器，示差折光率检测器均需测量最小检测浓度。 （1）紫外-可见光检测器和二极管阵列检测器浓度的测量方法：选用色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，紫外检测器的波长选在254nm，检测灵敏度调在最灵敏档，记录纸速调至5—10cm/min（使用工作站的设置好相关参数）。开机预热，待仪器稳定后记录30min，由检测器的衰减倍数和测得的基线峰—峰高对应的记录仪标度，按公式=KB计算基线噪声。保持操作条件，用微量注射器从进样口注入10～201×的萘/甲醇溶液，打印的色谱图及相关数据或记录色谱图并测量计算相关数据，由色谱峰高和基线噪声峰—峰高，计算最小检测浓度(按20L进样量计算)。 （2）荧光检测器测量方法：将仪器各部分连接正确，选用色谱柱，以85%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，灵敏度选在灵敏档，激发波长选在345nm，发射波长选在455nm，仪器预热稳定后，记录基线30min，根据检测器的衰减倍数和测得的基线峰-峰高对应的记录仪标度，按照=KB计算噪声漂移，用检测器自身的物理量（FU）做单位表示。在规程规定的条件下，待基线稳定后由进样器注入10~20μL的硫酸奎宁/高氯酸水溶液，记录色谱图，计算最小检测浓度。 （3）示差折光率检测器测量方法：选用色谱柱，将仪器各部分连接好，以HPLC用水为流动相，流量为1.0mL/min，参比池充满流动相，灵敏度选择在最灵敏档，接通电源，待仪器稳定30min后记录基线噪声，根据检测器的衰减倍数和测得的基线峰-峰高对应的记录仪标度，按照=KB计算基线噪声和基线漂移，用检测器自身的物理量（RIU）表示。 在规程规定的条件下，待基线稳定后由进样器注入10~20μL丙三醇水溶液，记录谱图，计算最小检测浓度。 数学模型 其中：——最小检测浓度，g/ml Nd——基线噪声，mm C——标准溶液浓度，g/ml V——进样体积，ul H——标准溶液的色谱峰高。 不确定度分析 （1）对于紫外-可见光检测器/二极管阵列检测器的不确定度分析与计算 已知萘/甲醇的不确定度为4%，某台液相色谱仪在(20±1)℃环境下，测得噪声和样品的峰高分别为3.68mm和31.42mm，其测量的不确定度均为0.02mm 所以 C＝1×10-7g/ml u(c)=1×10-7×4%=4×10-9g/ml Nd=3.68mm u(Nd)=0.02mm H=31.42mm u(H)=0.02mm CL=2.34×10-8 g/ml 1. 标准物质浓度的不确定度分量 所以 u(CI)c=2×3.68×4×10-9/31.42=0.93×10-9g/ml 2. 峰高测量的不确定度分量 所以 u(CI)H= 3. 噪声测量的不确定度分量： 所以 u(CI)Nd= 4. 检测器对组分响应的稳定性和记录仪灵敏度的不确定度分量与前三项不确定度分量相比是可以忽略不计的。 上述三项不确定度分量：u(CI)c、u(CI)H和u(CI)Nd互不相关，所以 不确定度u的包含因子k值取2，此时由u确定的置信区间具有置信水平约为95%，所以扩展不确定度： u=k﹒u(CI)=2×9.3×10-10 =1.86×10-9g/ml 相对扩展不确定度： Urel=u/ CL=1.86×10-9g/ml/2.34×10-8 g/ml=7.9% （2）对于荧光检测器的不确定度分析与计算 已知硫酸奎宁/高氯酸水溶液的不确定度为3%，某台液相色谱仪在(20±1)℃环境下，测得噪声和样品的峰高分别为5.91mm和19.13mm，其测量的不确定度均为0.02mm 所以 C＝1×10-9g/ml u(c)=1×10-9×3%=3×10-11g/ml Nd=5.91mm u(Nd)=0.02mm H=19.13mm u(H)=0.02mm CL=6.1×10-9 g/ml 1. 标准物质浓度的不确定度分量 所以 u(CI)c=2×5.91×3×10-11/19.13=1.85×10-11g/ml 2. 峰高测量的不确定度分量 所以 u(CI)H= 3. 噪声测量的不确定度分量： 所以 u(CI)Nd= 4. 检测器对组分响应的稳定性和记录仪灵敏度的不确定度分量与前三项不确定度分量相比是可以忽略不计的。 上述三项不确定度分量：u(CI)c、u(