生长抑素对小鼠急性肺损伤氧化应激的影响.docVIP

生长抑素对小鼠急性肺损伤氧化应激的影响 　　DOI：10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2013.11.009 　　基金项目：浙江省“十二五”高校重点学科建设计划资助；浙江省医学创新学科（11-CX26）；浙江省中医药重点学科（2012-XK-A28） 　　作者单位：325000 浙江省温州，温州医科大学附属第一医院急诊科 　　通信作者：卢中秋，Email：lzq640815@163.com 　　【摘要】目的 探讨生长抑素（somatostatin， SST）对内毒素（lipopolysaccharide， LPS ）致小鼠急性肺损伤（acute lung injury， ALI）中氧化应激的影响及可能的机制。方法 本实验于温州医科大学生物学实验教学中心科研平台完成。将96只SPF级ICR小鼠随机（随机数字法）分为健康对照组（ n =24），SST对照组（ n =24），急性肺损伤组（ n =24），SST干预组（ n =24）。健康对照组：腹腔注射等体积的生理盐水（40 mL/kg）；SST对照组：腹腔注射等体积的生理盐水（40 mL/kg）后于0.5、2、6、12 h时点皮下注射生长抑素（20 μg∶20 mL/kg）；急性肺损伤组：腹腔注射内毒素（12 mg∶40 mL/kg）；SST干预组：腹腔注射内毒素（12 mg∶40 mL/kg）后于0.5、2、6、12 h皮下注射生长抑素（20 μg∶20 mL/kg）。各组小鼠于首次给药后3、8、16 h活杀留取标本。烘干法检测肺组织的湿干质量比值，光镜下观察小鼠肺组织病理改变，化学比色法检测肺组织丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力等指标，酶联免疫吸附法（ELISA）检测肺组织醌氧化还原酶-1（NQO-1）的含量，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及免疫印迹法检测肺组织核因子E2相关因子2转录因子（Nrf2）mRNA和蛋白的表达。数据采用SPSS 19.0软件进行分析，组间比较采用单因素方差分析。结果 SST对照组与健康对照组比较，各测定数据差异无统计学意义（P0.05）。与健康对照组比较，急性肺损伤组小鼠肺组织湿干质量比值8 h、16 h升高明显（P=0.000），而SST干预组较急性肺损伤组小鼠（5.21±0.13）vs.（5.78±0.20）、（5.39±0.29）vs.（6.17 ±0.17）有明显下降（P=0.000）。光镜下，腹腔注射内毒素后小鼠肺组织损伤明显，SST干预组比急性肺损伤组小鼠肺组织损伤程度减轻。与健康对照组比较，急性肺损伤组小鼠肺组织3、8、16 h时点的MDA、NQO-1水平明显升高，SOD、CAT活力明显降低（P=0.000）；与急性肺损伤组比较，SST干预组小鼠肺组织MDA（ng/mg）（2.66±0.18）vs.（3.58±0.26）、（3.52±0.31）vs.（4.37±0.19）、（3.81±0.38）vs.（4.92±0.25）含量明显降低（P=0.000），CAT活力（U/mg）（9.21±0.47）vs.（7.90±0.32）、（10.06± 0.51）vs.（8.39±0.41）、（10.98±0.33）vs.（9.52±0.55）明显升高（均P=0.000），SOD活力、NQO-1含量3 h升高不明显（P=0.359、0.111），8 h、16 h时点的SOD活力（U/mg）（75.34±5.5）vs.（67.89±3.8），P=0.021、（64.82 ±4.2）vs.（50.31±5.0），P=0.000，NQO-1含量（ng/mg）（1.052 ±0.041）vs.（0.715±0.038）、（1.338±0.027）vs.（0.532 ± 0.028） （P=0.000）明显升高。与健康对照组比较，急性肺损伤组小鼠肺组织 Nrf2 mRNA和蛋白表达量明显升高（P=0.000）；与急性肺损伤组比较，SST干预组小鼠肺组织Nrf2 mRNA显著升高（P=0.023～0.000），3 h蛋白表达量升高不明显（P=0.101），8 h、16 h升高明显（P=0.000）。结论 氧化应激是内毒素血症小鼠急性肺损伤发生的重要环节，生长抑素可以通过上调Nrf2通路的表达活性，干预急性肺损伤小鼠肺部氧化应激损伤的信号传导，起到保护作用。 　　【关键词】内毒素；急性肺损伤；生长抑素；氧化应激；核因子E2相关因子2转录因子；小鼠 　　Effects of somatostatin against oxidative stress in mouse model of acute lung injury WU Bin， XU Li-yan， JIANG Yu