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意外抗体特异性鉴定 合肥市第一人民医院输血科 定 义 何为意外抗体？ 目前尚无明确定义，通常指不符合ABO血型系统Landsteiner法则的血型抗体，即非抗-A、抗-B、抗AB血型抗体(又称不规则抗体)。 意外抗体种类 种类繁多， 主要包括：Rh、Kidd、MNSs、Duffy、Diego、Xg、Kell、Lewis、Lutheran等血型系统产生的抗体。 筛查红细胞 以2个或3个人抗原互补（所得红细胞不可能都是纯合子红细胞）的不同红细胞为1套。 筛查细胞多不含低频率，不能检出低频率抗体。 筛查细胞的抗原涵盖范围应包括Rh、Kidd、MNSs、Duffy、Diego、Xg、Kell、Lewis、Lutheran等血型系统。 意外抗体检测方法 根据不同抗原的性质可选用不同的方法来检测，但主要的检测方法应包括：盐水介质法、酶法、抗球蛋白试验、低离子介质法。 常用检测方法介绍 1、盐水介质法 通常检测IgM类抗体，其中许多在22℃下反应最好。 在室温下有活性而37℃无活性时的抗体无临床意义，对患者或供血者样本检测不需要该方法。 37℃时有活性的样本（如抗Kell、抗D）有临床意义，但这些抗体常用抗人球蛋白试验和酶法来检测。 操作步骤（略） 2、酶法 酶技术能增强多种抗体反应，并且有少数红细胞血型抗体对其特别敏感（如Kidd、Rh系统抗体），但若抗原决定簇被酶破坏则不能检测其对应的抗体（如M、N、S、Fya、Fyb等抗原） 操作步骤 1、取受检血清2滴置于小试管中。 2、加2%试剂（筛查）红细胞悬液1滴。 3、加1%菠萝酶（或木瓜酶）pH5.5PBS溶液1滴，混合。 4、37℃温育30min。 5、离心，将试管轻轻侧动并观察有无凝集，记录结果。 3、抗人球蛋白试验 操作步骤 1、 取受检者血清2滴，置标记的小试管中，加2％～5％试剂红细胞盐水悬液1滴，37℃温育30～60min。 2、 离心，观察溶血和凝集，并记录结果。 3、 再彻底悬浮红细胞，用盐水洗涤3次。 4、最后一次洗涤后，弃取全部盐水，将试管边缘盐水用滤纸吸干。 5、 按试剂说明加抗人球蛋白血清1滴，充分混匀。 6、离心，轻轻悬浮细胞，观察凝集反应，记录结果。 7、若结果阴性，应加IgG包被的细胞1滴，离心并观察结果，如也不凝集，表示试验无效，必须重做。 4、低离子强度盐溶液（LISS）法 抗原抗体在低离子强度条件下发生反应，可缩短检出大多数抗体所需的温育时间。 操作步骤： 1、将适当容量的试剂红细胞用盐水洗涤3次，将盐水全部倾去。 2、用LISS溶液将红细胞配制成2%混悬液。 3、加受检血清2滴于标记的试管中。 4、加2%红细胞LISS悬液2滴。 5、混合，置37℃温育15min（延长温育时间可引起某些抗原性质改变，如Fya）。 6、离心，检查溶血及凝集，并记录结果。 7、用生理盐水洗涤3次，除尽洗液，加抗人球蛋白血清1滴。 8、离心，观察结果。 备注 为了证明37℃下有抗体活性的方法，盐水介质、LISS可任意选择，但抗人球蛋白试验是必需的。 意外抗体检测适用范围 1、ABO血型鉴定时发现受检者血清中有ABO血型以外的抗体（正反定型不符）。 2、供血者血清抗体筛检（特别时有妊娠史和输血史的供血者）。 3、输血前受血者血清抗体检查。 4、输血后溶血性输血反应疑为由同种抗体引起时。 5、孕妇血清的抗体检查。 6、新生儿溶血病婴儿血液中抗体检查。 7、直接抗球蛋白试验阳性时红细胞上抗体的 检查。 常见的筛查结果解释 1、A1或A1B型受血者血清（偶有少量抗H）和O型红细胞。A2型红细胞（大量H抗原）和A1型血清。 2、抗LebH抗体与O型Le（b+）红细胞反应，但不与A1或A1B型Le（b+）发生凝集反应。 3、A2型血清中有抗A1，和O型红细胞相合，和A1红细胞反应。 4、受检者血清中存在与低频率抗原反应的抗体。 5、受检者血清中存在仅与相应抗原的纯合子细胞反应的抗体。 意外抗体鉴定参考资料 1、被检者血型，包括ABO、Rh以及其他必需的血型。 2、以往输血史及妊娠史。 3、临床诊断，尤其是自身免疫性溶血性贫血（AIHA）。 4、药物治疗史。 5、了解以往曾做过的血型鉴定方法和试验温度。 6、与随机供血者红细胞阳性反应的频率和强度。 7、试验时有无溶血现象及剂量效应等。 局限性 1、阴性结果不一定意味着血清中无抗体，而只表明在使用该技术检测时，缺乏与该细胞反应的抗体。 2、谱细胞的涵盖范围应尽量扩大。 3、采用的试验种类增加。