分子生物学重点.docVIP

1,病毒感染宿主的步骤，对宿主的影响。病毒粒子。 是成熟和完整的病毒感染单位，结构包括衣壳粒、衣壳、核衣壳、囊膜。 吸附，进入，脱壳，复制和病毒蛋白的产生，装配和释放。 对宿主蛋白质合成的抑制 宿主mRNA的降解； 病毒mRNA同宿主mRNA之间竞争有限的核糖体； 对宿主翻译起始因子的影响 对宿主转录的干扰 宿主细胞转录的抑制 病毒高水平转录（携带自身编码的RNA聚合酶；转录激活因子；增强子） 病毒晚期转录的激活 对宿主DNA复制的影响 病毒抑制宿主蛋白质、RNA合成→影响宿主DNA复制 2，什么是干扰现象？原因。 概念：两种病毒同时感染同一细胞时，可发生一种病毒的增殖抑制另一种病毒复制的现象，即干扰现象。 原因 ：1）第一种病毒感染细胞后使细胞表面受体或代谢途径发生变化； （2）病毒感染细胞后可诱导细胞产生抑制病毒复制的一组蛋白 3，缺陷病毒，缺陷病毒颗粒 缺陷病毒（defective virus）：带有不完整基因组的病毒；当缺陷病毒不能复制但却能干扰同种成熟病毒体进入细胞时称DIP；具有两面性，一则干扰野毒株复制，二则在野毒株完整基因的辅助下可增殖出完整病毒。 4，重组和重配定义； 将有亲缘关系的两种病毒感染同一细胞时，经相互作用后，病毒间交换核酸片段，发生基因重组(recombination)。 分节段基因组病毒的基因重组(交换基因节段）称重配 5，干扰素定义，作用特点，（可以看下机制，他说 了这里有个简答题） 概念：是个体出生后，机体受到病毒或其他干扰素诱生剂刺激巨噬细胞、淋巴细胞以及体细胞等多种细胞产生的一种糖蛋白。A.广谱抗病毒活性，但只抑制病毒而无杀病毒功能； B.抗病毒作用有相对的种属特异性，一般在同种细胞中活性最高； C.调节免疫功能； D.抑制肿瘤细胞的作用 凡其核酸编码自己外壳蛋白与辅助病毒形成不同颗粒的称为卫星病毒凡其核酸不能编码外壳蛋白仅装配于辅助病毒蛋白衣壳的称卫星核酸 6，病毒，原核生物和真核生物的区别（分析的条件很多，从结构、基因组、基因的表达调控翻译转录），原核和真核dna复制、转录的区别。 真核生物是断裂基因有内含子，外显子，基因组较大，重复序列多，结构基因在基因组中占的比例小，真核生物基因调控序列为顺式作用元件，启动子及其元件，增强子及增强子元件，加尾信号，基因转录为单顺反子，产生的RNA需要进行加工剪掉内含子部分，多复制起始位点，多基因家族，转录和翻译起始位点不同，转录在核内，翻译在核糖体，转录、翻译不是同时进行。原核生物结构基因是连续的无内含子，基因组重复序列少，结构基因占比例大于真核。原核生物是操纵子结构-多结构基因，启动子、终止子，操纵元件，转录为多顺反子，产生的RNA不需要加工，单一起始位点，转录和翻译起始位点同，转录翻译偶联进行。 病毒基因组大小变异很大，核酸组成多变，为连续或不连续的基因组，基因是否有内含子和宿主保持一致，有基因重叠现象，多顺反子和单顺反子共存，一个基因产物翻译后可酶切出多个蛋白。 7，为什么RNA和逆转录病毒的变异最大。为什么人和细菌变化不及病毒？ RNA病毒的基因组rna是节段性的，不同病毒感染同一细胞后基因组rna会发生重组而产生新的血清型病毒，逆转录病毒的rna基因是随机插入到宿主细胞的，插入的位点有随机性。而且病毒没有3‘5’端的外切酶活性，无校正功能。第二个问题，因为人和细菌有3‘5’端的外切酶活性。 8，PCR的反应步骤，以及PCR与真核生物DNA复制的异同点 PCR技术 DNA生物复制 环境 体外复制， 加热，90摄氏度左右 体内，温和的环境 模板 DNA单链 DNA单链 原料 4种脱氧核糖核苷酸 Mg离子 4种脱氧核糖核苷酸Mg离子 酶 耐热的DNA聚合酶TAQ DNA解旋酶，DNA聚合酶，DNA连接酶等各种酶 引物 需要人工合成的引物 自己合成引物成分 步骤 变性--退火--延伸 解旋-起始-延伸-结束 原则 碱基互补配对原则 碱基互补配对原则 方向 5‘3’ 9，载体质粒的选择条件。端粒的概念及意义。 载体质粒的选择条件：A.分子量相对较小，能在细菌内稳定存