第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱1.pptVIP

 （二）血浆蛋白质的分类 2.功能分类法 （三）影响血浆蛋白质浓度的因素 疾病时血浆蛋白质的浓度变化被体内类固醇激素的状态复杂化，包括类固醇激素治疗、妊娠和口服避孕药。 正常图谱 肾病综合征 多发性骨髓瘤 三、血浆蛋白主要组分的生物化学检验 AAT是一种蛋白酶抑制剂，主要对抗多形核白细胞起吞噬作用时释放的溶酶体蛋白水解酶。所以当AAT缺乏时，可使蛋白水解酶过份地作用于肺泡壁的弹力纤维而导致肺气肿的发生。 2. C-反应蛋白的功能 ＆ 在钙离子存在下，CRP可结合卵磷脂和核酸及多种细胞、真菌、原虫等体内的多糖物质。 ＆ 结合后的复合体具有对补体系统的激活作用，引发对侵入细胞的免疫调理作用和吞噬作用，而表现炎症反应。 ＆ CRP也可识别和结合由损伤组织释放的内源性毒性物质，然后将其进行去毒或从血液中清除，同时CRP则自身降解。 ◆分子量：1.18万，存在于所有有核细胞的表面，特别是淋巴细胞和肿瘤细胞，并由此释入血循环，半衰期约2h。 ◆能完全透过肾小球滤过膜，肾小管几乎全部重吸收并分解。 ◆监测肾脏功能 2. β2-MG的临床意义： ◆急性白血病和淋巴瘤时，血中β2-MG上升 　第二节 蛋白质的检测 一、血清蛋白质的分析测定 1.总蛋白测定方法学概述 凯氏定氮法：参考方法 双缩脲法：是临床测定血清总蛋白首选的常规方法 酚试剂法 紫外吸收法 染料结合法：氨基黑、丽春红、考马斯亮蓝、邻苯 三酚红钼 （一）血清总蛋白测定 （二）血清总蛋白双缩脲法测定原理 血清中蛋白质的两个相邻肽键（-CO-NH-）在碱性溶液中能与二价铜离子作用产生稳定的紫色络合物。生成的紫色络合物颜色的深浅与血清蛋白质含量成正比，故可用来测定蛋白质含量。 （三）总蛋白测定方法学评价 凯氏定氮法 优点：准确性好，回收率达101.54 % ； 精密度高，CV%为0.85% 缺点：操作流程长，程序复杂。各种蛋 白质含氮量在疾病状态差异较大 等。 该法主要用作血清蛋白质标准品定值及参考性工作，血清总蛋白常规测定中很少使用。 双缩脲法 优点：显色稳定性好，干扰物质少，试剂单一，方法简便 缺点：灵敏度较低 优点：呈色灵敏度较高，达到双缩脲法的100倍左右，有利于检出较微量的蛋白质。 缺点：费时较长，试剂配制复杂，且专一性较差，大部分具有还原性的物质均有不同程度的干扰作用。且酪氨酸色氨酸各蛋白质比例不同。 酚试剂法 优点：简便而常用，因未加任何试剂和处理，可保留制剂的生物活性，多用于纯化的蛋白质样品。 缺点：准确性不如双缩脲法，因而不能作为常规方法广泛使用。 紫外吸收法 ①芳香族氨基酸280nm吸收峰：但因为各种蛋白质中芳香族氨基酸的含量与比例不同而有较大差异；且尿酸和胆红素在280nm附近也有干扰，故该法的准确性和特异性有限； ②肽键220～225nm强吸收峰： 但太高而需要大量稀释 。 浆细胞病的电泳图 电泳条带由上至下依次为Alb, α1, α2, β, γ区带 箭头所指为可疑M区带 　　　　　　　血清蛋白电泳图 多发性骨髓瘤IgG型 多发性骨髓瘤IgA型 1.前清蛋白 2.清蛋白 3.α1-抗胰蛋白酶 4.α1-酸性糖蛋白 5.触珠蛋白 6.α2-巨球蛋白 7.铜蓝蛋白 8.转铁蛋白 9.C-反应蛋白 10.β2-微球蛋白 （一）前清蛋白 （prealbumin，PA） ＆ 分子量：54kD；T?：1.9d； ＆ 主要包括：视黄醇结合蛋白和甲状腺素转运蛋白 ＆ PI=4.7 ；蛋白电泳时迁移至Alb的前方； ＆ 肝实质细胞合成，可作为组织修补材料和 运载蛋白。 1.性质： 2.前清蛋白的临床意义 ② 营养不良的指标 ③ 肝功能不全的指标 敏感 ① 负性急性时相反应蛋白 （二）清蛋白（albumin，Alb） 分子量66.2kD 不含糖，高度溶于水的血浆蛋白质 在生理pH环境中为负离子。 肝实质细胞合成 T?：19d 血浆中含量最多的蛋白质 1.性质： 2.清蛋白的生理功能 ①维持血浆胶体渗透压：血浆渗透压的75%～80%由Alb维持 ②血浆中主要的载体蛋白，具有结合各种配体分子的能力 ③缓冲酸碱，维持酸碱平衡作用 ④营养作用 3.清蛋白的临床意义 1） 降低 ◆ Alb合成不足 ◆ Alb的分布异常 ◆ Alb过度丢失 ◆ Alb分解代谢增加 2