第二章 农药残留检测技术【培训课件】.pptVIP

* 第四节 农药残留检测方法 经典检测技术 快速检测技术 * 农药残留经典检测技术 气相色谱法GC 气相色谱-质谱联用法GC-MS 高效液相色谱法HPLC 液相色谱-质谱联用法LC-MS * * 样品分析方法 GC/FPD- 适合有机磷和有机硫农残化合物 GC/ECD - 适合有机氯农残化合物 GC/NPD - 适合有机氮和有机磷化合物 HPLC - 适合氨基甲酸酯类化合物的分析 * 表5-1 食品中有机氯农药的最大残留限量/（mg/kg） 食物 最大允许残留限量 六六六 滴滴涕 原粮 0.05 0.05 蔬菜、水果 0.05 0.05 豆类、薯类 0.05 0.05 水产品 0.1 0.5 蛋品 0.1 0.1 肉及肉制品 脂肪含量10%以下(以原样计) 脂肪含量10%及以上(以脂肪计) 0.1 0.2 1 2 牛乳 0.02 1.0 乳制品 脂肪含量10%以下(以原样计) 脂肪含量10%及以上(以脂肪计) 0.01 0.01 0.5 0.5 茶叶 0.2 0.2 表5-2 食品中有机磷农药最大残留限量/（mg/kg） 农药名称及标准 食物 最大残留限量 农药名称及标准 食物 最大残留限量 马拉硫磷 GB2763—2005 原粮、大豆 8 乐果 GB2763—2005 稻谷、小麦、大豆 0.05 叶菜类蔬菜 8 叶菜类、甘蓝类蔬菜 1 甘蓝类、果菜类蔬菜 0.5 果菜类、豆类、茎类蔬菜 0.5 豆类蔬菜 2 鳞茎类蔬菜 0.2 芹菜 1 块根类蔬菜 0.5 块根类蔬菜 0.5 梨果类水果 1 梨果类水果 2 核果类、柑橘类水果 2 核果类水果 6 食用植物油 0.05 草莓 1 甲拌磷 GB2763—2005 小麦、高粱 0.02 葡萄 8 花生 0.1 柑橘类水果 4 花生油、棉籽 0.05 敌敌畏 GB2763—2005 原粮 0.1 对硫磷 GB2763—2005 原粮、棉籽油 0.1 蔬菜、水果 0.2 马铃薯 0.05 水胺硫磷 GB2763—2005 稻谷 0.1 蔬菜、水果 0.01* * 胆碱酯酶抑制法测定有机磷农药残留量 (本法参照GB/T 5009·199-2003) 研究最多且相对成熟的一种快速检测技术 快速现场检测方法： 农药速测卡法（农药残留试纸法） 农药速测片法 比色法 快速检测方法 * 1.酶抑制法原理 有机磷类(OPS)和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶(AchE)的活性具有很强的抑制作用。向样品中添加一定量的乙酰(或丁酰)胆碱酯酶，如果样品中含有上述两大类农药，即会对酶的活性产生抑制作用。当向含有农药的样品中添加底物(碘化硫代乙酰胆碱)和显色剂(二硫代二硝基苯甲酸)时，酶由于丧失活性而不能催化底物分解并完成显色反应；相反，如果样品中不含农药，胆碱酯酶则能催化底物分解并完成显色反应。通过分光光度计于412nm波长下比色，能测出颜色变化造成的吸光度之差，再通过吸光度的变化计算出酶的抑制率。酶的抑制率越大，说明样品中残留农药的含量越高。 * 酶抑制法显色原理 水解 加酶 显色剂 未水解 显色剂 不显色 显色 无农药 有农药 * 试剂： 1、磷酸盐缓冲溶液：3.2gKH2PO4和11.9gK2HPO4配成1000mL，PH8.0。 2、显色剂：160mg二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)和15.6mg碳酸钠，用20mL缓冲溶液溶解，4℃冰箱中保存。 3、底物：取25.0mg碘化硫代乙酰胆碱，加3.0mL蒸馏水溶解，摇匀后4℃冰箱中保存备用，保存期不超过2周。 4、胆碱酯酶溶液：称取0.040g丁酰胆碱酯酶(粉剂)或乙酰胆碱酯酶，加入2mL磷酸盐缓冲溶液，溶解后低温保存，1周内可用。 * 仪器设备： 1、农药残留快速测定仪或分光光度计。 2、分析天平。 3、恒温烘箱。 * 测定方法 加入5ml缓冲液 提 取 取2g样品（非叶菜类取4g），切碎 取 样 振荡1~2min 抑制反应 将上清液倒入试管中，静止3min备用 2.5ml样品提取液，加入0.1ml酶， 0.1ml显色剂（37度放15min）， 0.1ml底物 培 养 倒入比色杯测定记录反应3min的吸光度变化值△A。 仪器测定 * 结果计算与判定 抑制率(%)=[(△A0-△At)/ △A0]×100 式中： △A0-对照溶液反应3min吸光度变化值； △At?-样品溶液反应3min吸光度变化值。 当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检验2次以上。 * 活体生物检测 利用发光细菌检测农药残留 发光细菌体内的荧光素在有氧时经荧光酶的作用会产生荧光，但当受到某些有毒化合物的作用时发光会减弱，