基因工程微生物的培养简答题(附参考答案).docVIP

基因工程、微生物的培养习题精选 1、下图a示基因工程中经常选用的运载体——pBR322质粒，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因。目的基因如果插入某抗性基因中，将使该基因失活，而不再具有相应的抗性。为了检查运载体是否导入原本没有Ampr 和Tetr的大肠杆菌，将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素的培养基上，得到如图b的结果（黑点表示菌落）。再将灭菌绒布按到图b的培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布平移按到含四环素的培养基上培养，得到如图c的结果（空圈表示与b对照无菌落的位置）。据此分析并回答： （1）pBR322质粒的基本组成单位是 ，其控制着 等性状。该基因工程中，质粒上的Ampr、Tetr称为 基因。 （2）与图c空圈相对应的图b中的菌落表现型是 ，由此说明目的基因插入了 中，此大肠杆菌导入了 （填重组、没有重组）质粒。 （3）将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素、四环素培养基上的过程，属于基因工程基本操作步骤中的 ，该基因工程中的受体细胞是 。 （4）若用pBR322质粒作为载体，通过基因工程生产食品，是否存在食品安全性问题？试说明理由。 。 2、下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。 （1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？ ，为什么？ 。 （2）过程②必需的酶是 酶，过程③必需的酶是 酶。 （3）在利用AB获得C的过程中，必须用 切割A和B，使它们产生 ，再加入 ，才可形成C。 （4）若A中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，则③④⑤过程连续进行4次，至少需要提供胸腺嘧啶 个。 （5）为使过程⑧更易进行，可用 （药剂）处理D。通过图中方法生产的胰岛素可能不具备生物活性，为什么？ 。 （6）人的基因能和异种生物的基因拼接在一起，是因为 。 （7）如果将药物蛋白基因移到动物如牛、羊的膀胱上皮细胞中，利用转基因牛羊尿液生产提取药物比乳汁提取药物的更大优越性在于： 。 3、纤维素分子不能进入酵母细胞，为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精，构建了含3种不同基因片段的重组质粒，下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图。据图回答： （1）本研究构建重组质粒时看选用四种限制酶，其识别序列如下图，为防止酶切片段的自身环接，可选用的限制酶组合是____________。 （2）设置菌株Ⅰ为对照，目的是为了验证______不携带纤维素酶基因。 （3）纤维素酶基因的表达包括______和_____过程，与菌株相比，在菌株、中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有______。 （4）在以纤维素为唯一C源的培养基上分别培养菌株、、，菌株____不能存活，原因是______。 （5）酵母菌生产酒精的细胞部位是_____，产生酒精时细胞的呼吸方式是______。在利用纤维素生产酒精时，菌株更具有优势，因为导入的中重组质粒含有________，使分泌的纤维素酶固定于细胞壁，减少因培养液更新而造成的酶的流失，提高酶的利用率。 4、白僵菌可感染农业害虫，常防治害虫。由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感且杀死害虫的能力较弱，科研人员对其进行基因工程改造，流程如下图所示，请回答有关问题： 苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白，能有效杀死害虫。已知该基因的全部序列，科研人员可通过________法和 PCR 技术获得大量毒蛋白基因片段。据图分析，将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒l的过程需要用到的工具酶是_______________________。 重组质粒1和Bar基因(草丁膦抗性基因)各自用XbaI酶处理，得到酶切片段。重组质粒l的酶切片段再用去磷酸化酶处理，使末端游离的磷酸基团脱离，目的是防止_______。将未用去磷酸化酶处理的Bar 基因与重组质粒 l 连接，获得重组质粒2。获得的重组质粒2是下图中的__________。 将重组质粒2与感受态的白僵菌菌液混合进行转化，重组质粒2在白僵菌细胞内被修复。一段时间后用含有_________的培养基进行筛选，获得含有Bar基因的重组白僵菌。 提取上述重组白僵菌全部 mRNA，加入____________酶，获得 cDNA，再加入毒蛋白基因引物进行PCR 反应，根据是否