实验十三食品中铅的测定.docVIP

实验十三、食品中铅的测定 1、目的与要求 1.1 掌握双硫腙比色法测定铅含量的原理与方法。 1.2 熟悉721或722型分光光度计的工作原理和使用方法。 2、原理 样品经消化后，在pH8.5～9.0时，铅离子与双硫腙生成红色螯合物，可被三氯甲烷、四氯化碳等有机溶剂萃取，颜色的深浅与铅离子浓度成正比。加入盐酸?羟胺、氰化钾、柠檬酸铵等，可防止铁、铜、锌等离子干扰。 3、仪器与试剂 3.1 仪器 721或722型可见分光光度计 3.2 试剂 3.2.1 酚红指示剂：称取0.1g酚红，溶于100mL95%乙醇中，过滤。 3.2.2 20％柠檬酸铵溶液：称取50克柠檬酸铵，溶于100毫升水中，加2滴酚红指示液，用1:1氨水调至微红色 pH8.5～9.0 ，置于分液漏斗中，用双硫腙－三氯甲烷溶液分次提取，每次10mL～20mL，至溶剂层绿色不变为止。弃去双硫腙三氯甲烷层，再用三氯甲烷洗二次，每次5mL，弃去三氯甲烷层，加水稀释至250mL。 3.2.3 20％盐酸羟胺溶液：称取20克盐酸羟胺，加水溶解至约50mL，加2滴酚红指示液，用1:1氨水调至pH8.5～9.0 由黄变红，再多加2滴 ，置于分液漏斗中，同试剂2处理除铅和除去残余双硫腙，将盐酸羟胺溶液用盐酸酸化 呈黄色 ，加水至100mL。 3.2.4 10％氰化钾溶液：称取10g氰化钾，溶于100mL水中。如需除铅，称取20g溶于100mL水中，同试剂2处理除铅和残余双硫腙，最后稀释至200mL。 3.2.5 0.05%双硫腙贮备液：称取精制的双硫腙0.05g，加100mL三氯甲烷溶解，贮备于冰箱中。 3.2.6 双硫腙使用液：吸取1.0mL双硫腙贮备液，加三氯甲烷至10mL，混匀，用1cm比色杯，以三氯甲烷调节仪器零点，于波长510nm处测吸光度 A ，用下式算出配制100mL双硫腙使用液 70%透光率 所需双硫腙贮备液的毫升数。 3.2.7 铅标准溶液：精密称取0.1598g硝酸铅，加10mL1%硝酸，全部溶解后，移入100mL容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于1mg铅。 3.2.8 铅标准使用液：吸取1.0mL铅标准溶液于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于10μg铅。 3.2.9 所用玻璃仪器均用l0%～20％硝酸浸泡24小时以上，用自来水反复冲洗，最后用水冲洗干净。 4、操作方法 4.1 样品消化 4.1.1 湿消化法 硝酸-硫酸法 4.1.1.1酱、酱油、醋、豆腐乳、酱腌菜等：称取10.0克样品 或吸取10.0mL液体样品 ，置于250mL凯氏定氮瓶中，加数粒玻璃珠，l0mL硝酸，20mL浓硫酸，放置片刻，小火加热、待作用缓和，放冷，沿瓶壁加入1％硝酸，再加热，至瓶中液体开始变成棕色时，不断沿瓶壁滴加硝酸至有机质分解完全。加热火力，至产生白烟，溶液应澄清无色或微带黄色，放冷。在操作过程中应注意防止爆炸。 加20mL水煮沸，除去残余的硝酸至产生白烟为止，如此处理两次，放冷。将冷后的溶液移入50mL或100mL容量瓶中用水洗涤凯氏定氮瓶，洗液并容量瓶中再放冷，加水至刻度，混匀。定容后的溶液每lmL相当于2g样品或2mL样品。 4.1.1.2 含酒精性饮料或二氧化碳饮料：吸取10.0mL样，置于250mL凯氏定氮瓶中，加数粒玻璃珠，先用小火加热除去乙醇或二氧化碳，再加l0mL硝酸，20mL浓硫酸，混匀后，以下按4.1.1.1自“放置片刻……”起依法操作，但定容后的溶液每10mL相当于2m1样品。 4.1.1.3 含糖量高的食品：称取1.0克样品，置于250mL凯氏定氮瓶中，先加少许水使湿润，加数粒玻璃珠，10mL硝酸，摇匀，缓缓加入10mL硫酸，待作用缓和停止起泡沫后，先用小火缓缓加热 糖分易炭化 ，不断沿瓶壁加硝酸，待泡沫全部消失后，再加大火力，至有机质分解完全发生白烟，溶液应澄清无色或微带黄色，放冷。以下按4.1.1.1自“加20mL水煮沸……”起依法操作。 以上操作同时作空白试验。 4.1.2 干灰化法 4.1.2.1 糕点及其他含水分少的食品：称取5.0克样品，置于坩埚中，先在电炉上低温加热至炭化，然后移入高温炉中，500℃灰化3小时、放冷，取出坩埚，加lmL硝酸、湿润灰分，用小火蒸干，在500℃灼烧1小时，放冷，取出坩埚。加lmL硝酸，加热，使灰分溶解，移入50mL容量瓶中，用沸水洗涤坩埚,洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。 4.1.2.2 含水分多的食品或液体样品：称取5.0克或5.0mL样品，置于蒸发皿中，先在水浴上蒸于，再按4.1.2.1自“先在电炉上低温加热至炭化……”起依法操作。 4.2 样品测定 4.2.1 吸取10.0mL消化后的定容溶液和同量的试剂空白液，分别置于125m