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新生儿检测程序(新)
产后新生儿溶血病检测的操作程序
样品准备：
（一）红细胞悬液：
采集新生儿抗凝血（充分）3-5ml。
离心3000rpm，3min，取血浆备用。
取红细胞适量，用生理盐水洗涤三次，去上清液。
取洗涤后的压积红细胞适量5ul，用DianaSol 1溶液配制500ul 1％红细胞悬液。
（二）红细胞放散液制备：
采集新生儿抗凝血（充分）3-5ml。
离心3000rpm，3min。
取红细胞适量（0.5-1ml），用生理盐水充分洗涤三次，去掉上清液。
取洗涤后的压积红细胞适量，按1：1等量生理盐水混匀。
置56℃水浴，不断摇动10min。
保温离心3000转/2分钟。
速取樱红色上清液（即放散液）备用。
ABO/Rh血型鉴定＋直接Coombs实验：
取新生儿血型卡一张。
分别加入婴儿1%红细胞悬液8孔各50ul。
将卡放入孵育器孵育15min（37℃）。
将血型卡放入离心机离心。
判读结果。
游离实验和放散实验：
取戴安娜配血卡（Coombs）一张。
按A、B、O，A、B、O 标记6孔各加入1％的红细胞50ul。
前3孔各加入新生儿血浆50ul，后3孔各加入放散液各50ul。
将卡放入孵育器孵育15min（37℃）。
将卡放入离心机离心。
判读结果。
ABO血型以外的新生儿溶血病：
当直接Coombs实验阳性强度大于或等于“＋＋”时，考虑。
用乙醚放散法制备放散液。
分别对母亲血清和新生儿放散液作抗体鉴定。
判断规则：
类型 直接Coombs实验 游离实验 放散实验 新生儿溶血病 1 － － ＋ 是 2 当任意两项为＋时 是 3 ＋ ＋ ＋ 是 4 除以上情况外 否 注：RH血型系统或其他系统
放散液制备：试剂：等体积的氯仿和三氯乙烯混合物。
操作步骤：
生理盐水洗红细胞6次。
配1：1盐水红细胞混合液+入1体积氯仿和三氯乙烯混合物。
塞住试管口，用力摇动试管10秒，倒置1分钟混合均匀。
高速离心3000转/2分钟。
取上层的放散液（切忌混入中下层液体）
北京佰利申科贸有限公司
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