物质分离和鉴定wei论述.pptxVIP

观察类实验—显微镜的使用 实验名称 细胞的状态 染色剂 生物材料 观察DNA、RNA在细胞中的分布 观察线粒体 观察细胞的减数分裂 低温诱导染色体加倍 观察细胞的有丝分裂 观察叶绿体 ? 观察植物细胞的质壁分离与质壁分离复原 ? 死细胞 活细胞 死细胞 死细胞 死细胞 活细胞 活细胞 甲基绿 吡罗红 健那绿 改良苯酚品红染液 龙胆紫（或醋酸洋红） 人的口腔 上皮细胞 蝗虫精母细胞 洋葱根尖细胞 藓类的叶（或菠菜叶、黑藻叶） 紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞 （1）观察DNA、RNA在细胞中的分布可否选用哺乳动物成熟的红细胞？ （2）能否用观察叶绿体的材料来观察线粒体？ （3）观察细胞的有丝分裂或低温诱导染色体加倍时，应注意观察根尖中什么形状的细胞？ （4）观察细胞的减数分裂所选的材料可以是动物的精巢和植物的雄蕊，可否选用动物的卵巢和植物的雌蕊？ （5）观察叶绿体时，若选用菠菜叶则取稍带些叶肉的上表皮还是下表皮？ （6）观察植物细胞的质壁分离与质壁分离复原应选取成熟的植物细胞。 物质的提取、分离和鉴定类实验: 选材 中学实验有关的一些最常见的经典性的实验方法汇总如下： （1）化学物质的检测方法 如： ①淀粉—— ②还原性糖—— ③C02—— ④乳酸—— ⑤02—— ⑥无02—— ⑦蛋白质—— 碘液 斐林试剂 Ca（0H）2溶液或酸碱指示剂、溴麝香草酚蓝水溶液（与CO2反应变黄色） PH试纸 余烬复然 火焰熄灭 被蛋白酶分解、双缩脲试剂、燃烧 ⑧脂肪—— ⑨DNA —— ⑩ RNA —— ?线粒体—— ?酒精— 苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ 二苯胺(沸水浴)、甲基绿 咇罗红 健那绿 浓硫酸中的重铬酸钾（灰绿色） （2）实验结果的显示方法 如： ①光合速度—— ②呼吸速度—— ③原子移动途径—— ④细胞液浓度大小—— ⑤植物细胞是否死亡—— ⑥菌量—— 02产生量或CO2固定量或淀粉产生量 02消耗量或CO2产生量 放射性同位素示踪法 质壁分离、体积的变化 质壁分离 菌落数 （3）实验条件的控制方法 ①增加水中氧气—— ②减少水中氧气—— ③除去容器中CO2—— ④除去叶中原有淀粉—— ⑤除去叶中叶绿素—— ⑥除去光合对呼吸干扰—— ⑦如何得到单色光—— ⑧血液抗疑—— ⑨线粒体、细胞膜提取—— 泵入空气或吹气或放入绿色植物 容器密封或油膜覆盖或用凉开水 NaOH溶液 置于黑暗环境（饥饿处理） 酒精加热 给植株遮光 棱镜色散或薄膜滤光 加入柠檬酸钠 细胞匀浆离心 （4）实验中常用器材和药品的使用 NaOH： Ca(OH)2： CaCl2 HCl： NaHCO3： NaCl： 琼脂： 酒精： 蔗糖： 滤纸： 纱布、尼龙布： 龙胆紫溶液或醋酸洋红： 用于吸收CO2或改变溶液的pH 鉴定CO2 解离或改变溶液的pH 提供CO2 配制生理盐水或用于提取DNA 激素或其他物质的载体或培养基 用于消毒、提纯DNA、叶片脱色及配制解离液 测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原 过滤或纸层析 过滤，遮光 碱性染料，用于染色体染色 提高细菌细胞壁的通透性 微生物的培养与利用 微生物类群 微生物代谢特点 微生物培养 发酵技术 营养需求 分离纯化 无菌技术 培养基 计数 培养条件 五大类营养物质： 水、无机盐、碳源、氮源、生长因子 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏提供了哪些营养物质？ 自养型：利用无机碳源（光能自养型、化能自养型） 异养型：必需有机碳源——也是能源 硝化细菌、固氮菌所需的氮源、碳源分别是什么？ 1.营养需求 分类依据 类型 主要用途 物理 性质 固体培养基 菌种的分离、鉴定、计数 半固体培养基 观察微生物的运动、鉴定菌种 液体培养基 工业生产 化学 性质 合成培养基 菌种的分类、鉴定 天然培养基 工业生产 半合成培养基 工业生产 用途 选择培养基 抑制杂菌、促进所需菌生长 分离菌种 鉴别培养基 鉴别某些微生物的存在 培养基的配置： 菌落的价值 目的问题（代谢类型、用途）、营养问题（浓度和比例）、pH问题 菌落 2.无菌技术 消毒： 煮沸消毒 巴氏消毒 化学药剂消毒 紫外线消毒 灭菌： 灼烧灭菌 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 过滤除菌 3.分离纯化： 单个细胞与其他细胞分开 固体培养基上：分散的单菌落 平板划线 涂布法 平板划线法 3.分离纯化： 接种方法： 涂布法 稀释涂布法 接种方法： （1）稀释涂布法（间接的方法） 4.计数： 1mm 0.1mm （2）显微观察法：血球计数板（直接计数） 统计5个中格中各有多少酵母菌细胞 5.发酵技术： 发酵生产中的条件控制：无菌/营养/温度/pH/空气/连续培养措施； 制作原理:菌种/代谢类型