第11章紫外分光光度法2.pptVIP

教学目标 熟悉紫外可见光谱法的定性分析方法。 熟练应用单组分定量分析方法。 熟练应用双波长法和系数倍率法。 熟悉导数光谱法，了解褶合光谱法。 单组份的定量 例1 维生素B12的水溶液在361nm处的 值为207,盛于1cm的吸收池中，测得溶液的A值为0.414,求溶液浓度。 校正曲线法 导数光谱法定义 导数光谱法特点 导数光谱法定量分析 定量分析的依据： A=CE=C f(λ) dA/dλ=C dE/dλ d2A/dλ2=C d2E/dλ2 … … … … 定量方法：工作曲线法或标准对照法 导数光谱法峰高测定方法 小 结 * * 例2 称取维生素C 0.0500g , 溶于100ml的0.005mol/L的硫酸溶液中，再量取此溶液5.0ml稀释至250ml，取此溶液于1cm吸收池中，在?max245nm处测得A值为0.551,求样品中维生素C的百分质量分数。 245nm=560 0 50 100 150 0.2 A 0.4 C(?g/ml) 200 0.6 0.8 Ax Cx 1.配制标准溶液与样品溶液 2.分别测定上述溶液的吸光度 3.作标准曲线 4.从图中求出样品浓度 一元弱酸离解常数的测定 例：维生素B6的Ka测定 100.0 50 0 0 10.0 E 100.0 0 25 2 10.0 D 100.0 0 25 4 10.0 C 100.0 0 25 6 10.0 B 100.0 0 0 10 10.0 A 总体积(ml) pH7磷酸盐缓冲液体积(ml) 0.05mol/LNaAc体积(ml) 0.1mol/LHCl体积(ml) VitB6储备液体积(ml) 溶液 A ? ?1 ?2 a b 混合组分吸收光谱相互重叠情况示意图 A ? ?1 ?2 a b 混合组分吸收光谱相互重叠情况示意图 A ? ?1 ?2 a b 混合组分吸收光谱相互重叠情况示意图 A ? ?1 ?2 a 等吸收双波长消去法示意图 b ΔA A ? ?1 ?2 a 等吸收双波长消去法示意图 b ΔA A ? ?1 ?2 系数倍率法示意图 a b K：掩蔽系数，以5～7为宜。 一阶 二阶 三阶 零阶 将吸光度信号转化为对波长的导数信号的方法。导数光谱是解决干扰物质与被测物光谱重叠，消除胶体等散射影响和背景吸收，提高光谱分辨率的一种数据处理技术。 10ppm苯的乙醇液 1ppm苯的乙醇液 纯乙醇 1ppm苯的乙醇溶液， 二阶导数光谱 1ppm苯的乙醇溶液， 四阶导数光谱 选 择 性 及 灵 敏 度 均 提 高 正切法：相邻峰(极大或极小)切线中点至相邻峰切线(极小或极大)的距离d。 峰谷法：两相邻峰值(极大或极小)间的距离p1或p2。 峰零法：极值峰至零线间的距离z。