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Exo III 介导的LIC高效克隆系统的建立及载体重建;一、L I C背景; 带缺口和突出端的DNA复合物在细菌中能被 有效地修复;载体和目的片段间,只要带有足够长的同源粘性末端(8bp),经退火,转化E.coil. 即可获得完整的质粒DNA;获得粘性末端;获得粘性末端;用ExoIII处理具有同源序列的载体和片段:;在用ExoIII处理载体和片段,获得粘性末端的同时势必会出现两种不可避免情况:;获得同源序列;我们最关注的问题是:;二、实验过程;用ExoIII进行处理,能够达到高效克隆的目的;;条件优化一;条件优化二;条件优化三;最高效的克隆条件;最高效的克隆条件;载体重建 ;通用序列:(No-tag);我们所获得的带通用序列的载体:
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