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APT-第二步实验-阳离子纯化20150125
APT-第二步实验-阳离子纯化
MMC
时间 层析柱规格16*20 介质名称MMC Diamond 层析介质量30.8ml 样品名称DEAE (6HP 5峰上样量约32mg样品处理用Hcl调PH至6.0 上样体积45ml程序如下:
Time(min)B﹪Flow(ml/min)Fracton(min/管)002245022465221708022BufferA:0.02mol/L PH 6.0 Tris-Hcl+0.1mol/L NaclBufferB:0.02mol/L PH 6.0 Tris-Hcl+1mol/L Nacl图谱如下:
效价检测结果如下:
样品名称10ug聚集率%2ug聚集率%1ug聚集率%粗毒30ug/18.53100//空白84.56//DEA上样液,0.506mg/ml33.03/73.77//DEAE/MM流穿,0.43mg/ml70.09//DEAE/MM38-50t,0.063mg/ml76.07//DEAE/MM58-64t,0.081mg/ml73.46//DEAE/MM65-71t,0.080mg/ml77.4//结果显示:收集峰与流穿峰均无效价。
时间 层析柱规格16*20 介质名称MMC Diamond 层析介质量28.6ml 样品名称DEAE (6HP6峰上样量约21mg样品处理用HAC调PH至4.5 上样体积40ml
程序如下:
Time(min)B﹪Flow(ml/min)Fracton(min/管)001.536001.536151.53190801.53BufferA:0.02mol/L PH 4.5 NaAC-HAC+0.1mol/L NaclBufferB:0.02mol/L PH 4.5 NaAC-HAC+1mol/L Nacl
MMC层析MMC样品0.483mg/ml-4.94絮团状物出现MMC样品10-32t,0.165mg/ml84.19 MMC样品38-53t,0.131mg/ml86.62 MMC样品55-70t,0.138mg/ml
时间 样品名称DEAE (6HP6峰
图谱如下:
MMC层析MMC上样液0.626mg/ml1.63絮团状物出现MMC原样0.616mg/ml-2.91 MMC-8-14t0.186mg/ml97.38 MMC-15-19t0.161mg/ml77.57 MMC-20-25t0.164mg/ml87.5 MMC-26-32t0.140mg/ml100 MMC-35-41t0.146mg/ml92.56
CM-FF
时间 层析柱规格16*20 介质名称CM Bestarose FF 层析介质量24ml 样品名称DEAE (6HP 4-5峰上样量31.8mg样品处理用G-25柱交换HAC使 PH至4.5 上样体积55ml程序如下:
Time(min)B﹪Flow(ml/min)Fracton(min/管)001.536001.536151.53190801.53BufferA:0.02mol/L PH 4.5 NaAC-HACBufferB:0.02mol/L PH 4.5 NaAC-HAC+1mol/L Nacl图谱如下:
CM层析(DEAE-4,5峰上样)CM上样液D-G25,0.356mg/ml2.33;4.01絮团状物出现CM流穿8-26t,0.129mg/ml-26.97CM31-33t,0.104mg/ml78.8 CM34-36t,0.230mg/ml4
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