10.8核酸1.ppt

（3） 根据蛋白质的带电性质不同进行分离 电泳 根据支撑物的不同， 可分为薄膜电泳、凝胶电泳等。 ;（4） 根据配体特异性进行分离 ;3 蛋白质分子中氨基酸序列的确定;本章小节;思考题： 1、如何计算氨基酸的pI。 2、什么是蛋白质的一、二、三、四级结构？ 3、维持蛋白质空间结构的力有哪些？ 4、简述蛋白质结构与功能的关系？ ;第二章 核酸化学;概 述; 1869年Miescher博士论文工作中测定淋巴细胞蛋白质组成时, 发现了不溶于稀酸和盐溶液的沉淀物, 并在所有细胞的核里都找到了此物质, 故命名核质(Nuclein)。; 1909年Levene发现酵母的核酸含有核糖。 1930年Levene发现动物细胞的核酸含有一种特殊的核糖即脱氧核糖, 得出了一个错误概念: 植物核酸含核糖,动物核酸含脱氧核糖。这个错误概念一直延续到1938年，这时方清楚RNA和DNA的区别。Levene还提出了核酸的“磷酸-核糖(碱基)-磷酸”的骨架结构, 解决了DNA分子的线性问题, 还在1935年提出“四核苷酸”学说, 认为这四种核苷酸的聚合体是构成核酸的基本单位。; 1944年Avery重做1928年Griffith的细菌转化实验，证明DNA是遗传物质。; 1950年Chargaff,E和Hotchkiss,R.D.采用纸层析法仔细分析了DNA的组成成分, 得知[A]=[T], [G]=[C], [A+G]=[C+T] 1953年Watson, Crick根据DNA的X射线图谱的研究结果, 提出了DNA的双螺旋模型(Double helix)。几星期后提出了半保留式复制模型。 1957年Meselson Stahl用密度梯度超离心法, 证实半保留复制假说。 1958年Kornberg得到高纯度的DNA polymerase(DNA聚合酶), 这种酶需要一个模板DNA。 1960年Cairns拍摄了复制中的细菌DNA的电镜照片。 1970年发现第一个DNA限制性内切酶。 1972年建立DNA重组技术。 1978年建立DNA的双脱氧测序法。 1990年开始实施人类基因组计划。 1994年 中国人类基因组计划启动 2003年人类基因组计划宣告完成测序任务。;二、核酸的分类及分布、功能;3.1 核酸的分子组成;一、核酸元素组成;3.1.1 戊 糖; 在核酸中，戊糖的第一位与碱基形成糖苷键，所形成的化合物成为核苷。 核苷中戊糖的原子编号改为1 ?，2 ?，3 ? ·····。;3.1.2 碱 基（含氮碱）;胺式亚胺式互变异构;酮式烯醇式互变异构;稀有碱基的种类很多，大部分是上述碱基的衍生物。;碱基在细胞中受到各种各样的修饰后，其产物常常扮演信号传导信使分子、营养因子、辅酶等角色，并对核酸结构的稳定性起着重要作用.;碱基的结构特征;3.1.3 核苷 (nucleoside);顺鸟苷;3.1.4 核苷酸(ribonucleotide) ;（1）核苷酸的结构与功能; 核苷酸中的核糖有3个自由的羟基 —— 2 ?-，3 ?-，5 ?-核苷酸 脱氧核苷酸的核糖上只有2个自由羟基 —— 3 ?-，5 ?-脱氧核苷酸 生物体内的游离核苷酸多为5 ?-核苷酸，因此通常将核苷- 5 ?-磷酸简称为核苷酸; 酶水解DNA或RNA，除得到5 ?-核苷酸外，还可得到3 ?-核苷酸。; 生物体内的腺苷酸AMP可与1分子磷酸结合，生成腺苷二磷酸（ADP），ADP再与1分子磷酸结合，生成腺苷三磷酸（ATP）。;各种核苷三磷酸（ATP，GTP，CTP，UTP）是体内RNA合成的直接材料。 各种脱氧核苷三磷酸（dATP，dGTP，dCTP，dTTP）是体内DNA合成的直接材料。;核苷三磷酸化合物在生物体的能量代谢中 起着重要作用。;ATP的性质;环化核苷酸cAMP和cGMP; 腺苷酸是一些辅酶的结构成分;（1）核苷酸的性质; 当pH处于第一磷酸基和碱基环解离曲线的交点时，二者解离度相等，第二磷酸基尚未解离，这一pH为该核苷酸的等电点。;3.2 核酸的一级结构; DNA和RNA都是没有分支的多核苷酸长链，链中每个核苷酸的3?-羟基和相邻核苷酸戊糖上的 5?-磷酸相连。;一级结构（primary structure）是指各核苷酸残基沿多核苷酸链的排列顺序。 核苷酸的排列顺序代表了遗传信息。;;3.3 DNA的二级结构; DNA的碱基成对的证据 查加夫规则（Chargaff 规则）：数目基本相等 腺嘌呤[A] = 胸腺嘧啶[T] 2个氢键