基因工程同步(苏教版选修3)讲述.ppt

文库类型 cDNA文库 基因组文库 文库大小 小 大 基因中启动子(具有启动作用的DNA片段) 无 有 基因中内含子(位于编码蛋白质序列内的非编码DNA片段) 无 有 基因多少 某种生物的 部分基因 某种生物的 全部基因 物种间的基因交流 可以 部分基因可以 下列关于基因工程的叙述，不正确的是 (　　)。 A．基因工程的原理是基因重组 B．运用基因工程技术，可使生物发生定向变异 C．一种生物的基因转接到另一种生物的DNA分子上，属于 基因工程的内容 D．是非同源染色体上非等位基因的自由组合 解析　基因工程实现了将一种生物的基因与另一种生物的基因组合到同一个体中的愿望，所以这是一种基因重组现象。基因工程是两种生物间的基因重组，而非同源染色体上非等位基因的自由组合仅限于一种生物的一个个体减数分裂时才能实现。 答案　D 1． 下列关于DNA重组技术中基本工具的叙述，正确的是 (　　)。 A．限制酶的作用部位是特定的两个核苷酸之间的氢键 B．目的基因经限制酶切割后一定会形成黏性末端 C．DNA连接酶用来连接两个核苷酸之间的磷酸二酯键 D．质粒DNA分子上一定含有抗四环素基因 解析　限制酶的作用部位是两个核苷酸之间的磷酸二酯键，而不是氢键。被限制酶切开后的DNA可以形成黏性末端，也可能形成平口末端。有的质粒上可能含有一些其他抗性基因。 答案　C 2． 下列DNA片段能够用DNA连接酶连接起来的是 (　　)。 …GC　　 　G…　 GT…　…CTGCA　CG…　…G …CG　TGCAC…　CA…　…G　　　　GC…　…CTTAA 　①　　　②　　　 ③　　　　④　　 ⑤　　　　⑥ A．①和⑤ B．①和⑤、②和④ C．①和③ D．①和③、④和⑥ 解析　黏性末端如果碱基数目相同且能够互补配对即可用DNA连接酶相连；平口末端则碱基相同且两条链序列相反即可用DNA连接酶连接，具备这个特点的只有①和⑤。 答案　A 3． 已知某种限制酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是 (　　)。 4． 图线性DNA分子的酶切示意图 A．3 B．4 C．9 D．12 解析　三个酶切位点切割的情况有三种：只切一处，切两处，切三处。分开研究即可，共有a、b、c、d、ab、bc、cd、abc、bcd 9种DNA片段。 答案　C 请回答下面有关基因工程的问题。 (1)构建基因表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生________末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生________(相同、不同)黏性末端的限制酶。 (2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是________。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用________处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为________。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成________，常用抗原—抗体杂交技术。 5． (3)如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的________上。 解析　(1)DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平口末端。当限制酶在它识别序列的中心轴两侧将DNA切开时，产生的是黏性末端，而当限制酶在它识别序列的中心轴线切开时，产生的是平口末端。要使目的基因和质粒直接进行连接，应使用同种限制酶切割目的基因和质粒，使二者产生相同黏性末端。 (2)一个基因表达载体的组成，除含有目的基因外，还必须有启动子、终止子和标记基因。启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因首端，是RNA聚合酶识别和结合部位，可以驱动目的基因转录出mRNA。在用表达载体转化大肠杆菌时，为便于表达载体进入，常用CaCl2(或Ca2＋)处理大肠杆菌。要检测目的基因是否转录出对应的mRNA，可采用分子杂交技术，即用目的基因片段作探针，与mRNA杂交，如果显示出杂交带，则表明目的基因转录出了mRNA。 (3)运用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞时，要先将目的基因插入农杆菌Ti质