新型抗精神失常药物的神经保护作用及其可能的分子机制.docVIP

新型抗精神失常药物的神经保护作用及其可能的分子机制 房绍宽 ? 【摘要】：许多神经系统疾病伴有精神症状，临床上把脑部有组织形态方面改变所致的精神障碍称为脑器质性精神障碍，其中脑卒中后抑郁较为常见，其它脑器质性精神障碍，如：颅内感染所致精神障碍、脑外伤所致精神障碍、癫痫性精神障碍、脑肿瘤所致精神障碍、阿尔茨海默病所致的精神障碍等在神经科也比较常见。卒中后抑郁是指脑卒中病人出现不同程度的抑郁症状，是脑血管病的常见并发症之一，在脑卒中治疗中，人们往往较多重视肢体功能的恢复，而忽略了脑卒中后抑郁的治疗，由于卒中患者多数为老年患者，抗抑郁药的选择则需慎重，传统的三环类抗抑郁药虽然对脑卒中后抑郁有较好疗效对神经功能恢复也有帮助，但由于其严重的副作用而不适用于老年患者，适当的药物选择在脑卒中后抑郁的治疗中非常重要。近年来开发出许多抗精神病和抗抑郁新药。非典型抗精神病药喹硫平、奥氮平在临床上被广泛的应用于治疗精神分裂症，新型抗抑郁药万拉法辛在抑郁症的治疗特别是在脑卒中后抑郁的治疗中被广泛应用，临床证据表明长期应用这些药能改善病人远期预后。有研究表明喹硫平可以减少应激状态大鼠海马锥体和齿状回神经元BDNF表达量的下降[1]，这提示我们某些抗精神失常药物可能具有神经保护作用。 本研究拟寻找既有神经保护作用同时能缓解精神障碍的药物，为临床患有神经系统器质性疾病所致精神障碍特别是脑卒中后 WP=43 抑郁的患者提供帮助。为探索喹硫平、奥氮平和万拉法辛是否具有神经保护作用，本研究采用无血清及Ａβ25-35毒害的pc12细胞为研究对象来探讨抗精神失常药万拉法辛、奥氮平、喹硫平的神经保护作用。 本研究分为两个部分，第一部分将培养的PC12细胞分为三组：正常对照组，无血清组和药物保护组。无血清组撤掉血清，药物保护组在撤掉血清同时加入抗精神失常药万拉法辛、奥氮平、喹硫平，分别应用倒置显微镜对比观察细胞形态学、用生化自动分析仪检测各组细胞LDH释放量、用酶联免疫检测仪测定各组细胞琥珀酸脱氢酶活性，观察这几种药物是否具有神经保护作用以及哪种药物神经保护作用最强，并从中选出这几种药物分别在什么浓度最有效的发挥神经保护作用，并在这一浓度下分别培养细胞24h、48h、72h、120h，然后同样作细胞活性检测，观察药物神经保护作用的时间依赖性。 结果显示100μM奥氮平、50μM喹硫平、20μM万拉法辛保护组细胞数比无血清组显著增多，受损变圆的细胞数明显减少。药物保护组LDH活性显著低于无血清组（P0.01）；MTT显著高于无血清组（P0.01）。数据显示100μM奥氮平、50μM喹硫平、20μM万拉法辛保护组与无血清组相比细胞活性明显升高（P0.01），其中20μM万拉法辛细胞活性升高最明显，药物浓度升高到以上浓度的2倍时可能对细胞有损伤作用，不同时间点细胞活性检测结果显示培养48小时细胞活性最大。第二部分将培养的PC12细胞分为三组：正常对照组，Ａβ损伤组和药物保护组。Ａβ损伤 WP=44 组用Ａβ25-35 处理细胞，药物保护组在用Ａβ25-35处理前2h加入抗抑郁药万拉法辛。 第二部分应用倒置显微镜对比观察细胞形态学、用生化自动分析仪检测各组细胞LDH释放量、用酶联免疫检测仪测定各组细胞琥珀酸脱氢酶活性、应用免疫组化法观察Ｂax蛋白表达、应用western blot法检测Bcl-2蛋白表达。观察抗抑郁药万拉法辛的神经保护作用及其机制。 结果显示Ａβ损伤组Bcl-2的表达比正常对照组低；万拉法辛保护组Bcl-2的表达比Ａβ25-35损伤组升高，Bax蛋白表达在各组细胞中无明显变化。 从本研究结果我们得出了结论：抗精神失常药万拉法辛、奥氮平、喹硫平对撤掉血清诱发PC12细胞损伤有显著的保护作用，且20μM万拉法辛的神经保护作用最强；抗抑郁药万拉法辛对Ａβ25-35 诱发PC12细胞损伤有显著的保护作用，其机制可能和万拉法辛升高Bcl-2蛋白水平有关。 总之，本实验采用体外细胞培养方法及免疫组织化学、蛋白印记等实验手段探讨了抗精神失常药万拉法辛、奥氮平、喹硫平的神经保护作用及其可能机制对脑器质性精神障碍及Alzheimer病的治疗提供有意义的资料。对于患有脑器质性疾病合并精神障碍特别是脑卒中后抑郁的病人应用这些药干预可能会取得很好的疗效。