土壤微生物数量.docVIP

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土壤微生物数量

土壤微生物数量测定 (一)培养基的制备: Ⅰ测定微生物总量培养基: 1. 细菌培养基(牛肉膏蛋白胨牛肉膏Beefextract5.0g 蛋白胨Peptone10.0g NaCI 5.0g 蒸馏水H201000m1 PH 7.2~7.4 2. 放线菌培养基 (高氏1号 可溶性淀粉20g KNO3 1g K2HPO4 0.5g MgSO4? 7H2O 0.5g NaCl 0.05g FeSO4? 7H2O 0.01g pH 7.2-7.4 注:配制时,先用少量冷水,将淀粉调成糊状,倒入少于所需水量的沸水中,在火上加热,边搅拌边依次逐一溶化其他成分,溶化后,补足水分到100ml,调pH。 g MgSO4.7H2O O.5g 蛋白胨g 孟加拉红 33.4mg (或者每升加1%溶液3.3mL) K2HPO4 1g 蒸馏水H201000m1 PH 自然(4~5) 注:⑴灭菌前加卡那霉素20μg/ml,或者倒平板之前加链霉素。 ⑵倒平板之前加乳酸,每100mL培养基加0.lmL。 以上培养基皆加琼脂15g/L。 Ⅱ测定功能菌所用培养基: 1.亚硝酸细菌培养基(改良的斯蒂芬逊(Stephenson)培养基A) (NH4)2SO4 2.0g NaH2PO4 0.25g MnSO4·4H2O 0.01g MgSO4·7H2O 0.03g K2HPO4 0.75g CaCO3 5.0g 蒸馏水 1000ml PH 7.2 注:CaCO3最后加,不需要溶解,培养基中有这个成分是为了缓冲pH硝化细菌的生长会产生酸化效应使得氢离子过剩到了一定程度硝化作用将无法继续所以要碱性物质平衡酸碱·7H2O 0.03g MnSO4·4H2O 0.01g CaCO3 1.0g Na2CO3 1.0g NaNO2 1.0g 蒸馏水 1000ml PH 7.2 3. 反硝化细菌培养基 柠檬酸钠 5.0 g KNO3 2.0 g KH2PO4 1.0 g, K2HPO4 1.0 g MgSO4·7H2O 0.2 g 蒸馏水 1000 ml pH值 7.2~7.5 4.好气性自生固氮菌培养基(改良阿须贝(Ashby)无氮培养基) 苯甲酸钠 1.5 g K2HPO4 0.2 g MgSO4·7H2O 0.2 g NaCl 0.2 g CaSO4·2H2O 0.1 g PH 7.4—7.6 注:在培养基分装入试管时,每管加入一1cm滤纸长条,要露出液面。 5.氨氧化细菌培养基(蛋白胨氨化培养基) K2HPO4 0.5 g KH2PO4 0.5 g, MgSO4·7H2O 0.5 g 蛋白胨 5.0 g 蒸馏水 1000ml PH 7.0~7.2 6. 好气性纤维素分解菌培养基(依姆歇涅茨基纤维素分解菌培养基) KH2PO4 1.0 g FeCl3·6 H2O 0.1 g MgSO4·7H2O 0.3 g CaCl2·6H2O 0.1 g NaCl 0. 1 g NaNO3

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