8核酸的酶促降解及核苷酸代谢.pptVIP

限制性内切酶 常用的DNA限制性内切酶的专一性 限制性内切酶的命名和意义 嘌呤的降解 嘧啶的降解 一、核糖核苷酸的生物合成 一、核糖核苷酸的生物合成 从头合成(de novo synthesis)途径：利用氨基酸、磷酸戊糖、一碳单位及CO2等简单物质为原料，经过一系列酶促反应合成核苷酸。 补救途径(salvage pathway) ：利用体内游离的碱基或核苷合成核苷酸。 1、嘌呤核苷酸的从头合成途径 嘌呤环上各原子的来源 IMP转变为AMP和GMP 尿嘧啶核苷酸合成途径 3、核苷酸合成的补救途径 测 试 是非题 1. 糖酵解过程在有氧无氧条件下都能进行（ ） 2. TCA被认为是需氧途径，因为氧在循环中是底物（ ） 3.EMP途径是人体内糖、脂肪和氨基酸代谢相联系的途径（ ） 4.剧烈运动后肌肉发酸是因为丙酮酸被还原为乳酸的结果（ ） 5.只有偶数碳原子的脂肪才能被氧化降解成乙酰CoA。（ ） 6.谷氨酸在转氨基作用和使游离氨再利用方面都有重要作用（） 7.芳香族氨基酸都是通过莽草酸途径产生的（ ） 8.尿嘧啶的分解产物β－氨基丙酸能转化成脂肪酸（ ） 9.嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸的生物合成途径都是先合成碱基环再与磷酸核糖生成核苷酸（ ） 10.乙醛酸循环是生物体内普遍存在的一条代谢途径，该循环可作为TCA循环的辅助途径（ ） 生物体内，四种核糖核苷酸均在核糖核苷二磷酸还原酶作用下被还原成相应的脱氧核糖核苷酸。 第三节 核苷酸的合成 二、脱氧核糖核苷酸的生物合成 NADP+ NADPH+H+ 硫氧还蛋白还原酶 FAD 核糖核苷酸还原酶 ATP 、Mg2+ 硫氧还蛋白（还原型） SH SH 硫氧还蛋白（氧化型） S S O P-P-CH2 N OH OH 核糖核苷二磷酸 O P-P-CH2 N OH H + H2O 脱氧核糖核苷二磷酸 嘌呤核苷酸合成小结 嘧啶核苷酸合成小结 1、从头合成的概念。 2、嘌呤及嘧啶从头合成各原子的来源。 尿囊素是除人和猿类以外其他哺乳动物嘌呤代谢的排泄物。 植物和微生物体内嘌呤代谢的途径大致与低等无脊椎动物类似。嘌呤的脱氨可以在其核苷和核苷酸的水平上发生。 嘌呤代谢的终产物。为三氧基嘌呤，其醇式呈弱酸性。各种嘌呤氧化后生成的尿酸随尿排出。因溶解度较小，体内过多时可形成尿路结石或痛风。当血液中尿酸浓度过高时，尿酸即以钠盐的形式沉积在关节、软组织、软骨和肾脏中，引起组织的异物炎性反应，就叫痛风。 生物体内存在多种核酸水解酶，水解磷酸二酯键，分为DNA酶和RNA酶，根据作用方式分为外切酶与内切酶。牛胰RNA酶A为非特异性内切酶，DNaseI为非特异性内切酶。单链的核酸外切酶包括大肠杆菌核酸外切酶Ⅰ（exoⅠ）和核酸外切酶Ⅶ（exoⅦ）。核酸外切酶Ⅶ（exoⅦ）能够从5′-末端或3′-末端呈单链状态的DNA分子上降解DNA，产生出寡核苷酸短片段，而且是唯一不需要Mg2+离子的活性酶，是一种耐受性很强的核酸酶。核酸外切酶Ⅶ（exoⅦ）可以用来测定基因组DNA中一些特殊的间隔序列和编码序列的位置。它只切割末端有单链突出的DNA分子， 实际操作时需要配合解旋酶操作。 双链的核酸外切酶包括大肠杆菌核酸外切酶Ⅲ（exoⅢ）、λ噬菌体核酸外切酶（λexo）以及T7噬菌体基因6核酸外切酶等。大肠杆菌核酸外切酶Ⅲ（exo Ⅲ）具有多种催化功能，可以降解双链DNA分子中的许多类型的磷酸二酯键。其中主要的催化活性是催化双链DNA按3′→5′的方向从3′-OH末端释放5′-单核苷酸。大肠杆菌核酸外切酶Ⅲ（exoⅢ）通过其3′→5′外切酶活性使双链DNA分子产生出单链区，经过这种修饰的DNA再配合使用Klenow酶，同时加进带放射性同位素的核苷酸，便可以制备特异性的放射性探针。 限制性内切酶有三种类型，常用的是II型。到 2005 年 1 月，共发现 4342 种限制酶和甲基化酶，其中限制酶有 3681 种，包括 Ⅰ 型、 Ⅱ 型、 Ⅲ 型限制酶各有 59 、3612 、10 种，甲基化指导的限制酶有 3 种，商业化的限制酶有 588 种，在 Ⅱ 型限制酶中共有 221 种特异性。 氨基丙酸与B-氨基异丁酸可以像氨基酸一样参加代谢，可分别通过转氨基作用和活化作用转变成丙二酸单酰CoA（脂肪酸合成前体）和甲基丙二酸单酰CoA，后者可转变成琥珀酰CoA，琥珀酰CoA属于高能化合物，在琥珀酸硫激酶的作用下生成琥珀酸，并发生底物水平磷酸化，生成GTP（植物中为ATP）。 这两条途径在不同组织中的重要性不同。细胞内核酸降解产生的碱基多用于补救途径，有利于细胞节省能量。 研究表明不同的生物具有完全相同的嘌呤核苷酸生物合成途径。且嘌呤最初是以核糖核苷酸的形式生成的，而不是先生成游离的碱基。 合成一个IMP需消耗5个ATP分子。IMP