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* * 胰蛋白酶水解蛋白质 * 胃蛋白酶最适PH约为2.在PH为7的环境下已经失去活性 * 50代细胞以后,细胞发生了癌变 2.2.1 动物细胞培养 学习目标: 1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用 2、对比说出动物细胞培养与植物组织培养原理、条件、结果、培养目的 自主学习:阅读P44第5段,思考下列问题: 1、什么叫动物细胞培养? 2、动物细胞培养的原理是什么? 一、动物细胞培养 概念:从动物机体中取出相关组织,将它们分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 原理: 细胞增殖 如何进行动物细胞培养? 放入二氧化碳培养箱中培养 动物细胞培养过程示意图 结合问题,阅读书本,讨论写出动物细胞培养的流程图。 学习活动一: 自主学习:阅读p45流程 1、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢 2、如何将动物组织分散成单个的细胞? 3、胰蛋白酶的作用是什么?由此可说明细胞间的 物质主要是什么成分? 4、培养瓶或培养皿的内表面为何要光滑、无毒? 5、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖? 原代培养:通常将直接从动物体内取出的动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 传代培养:原代培养的细胞出现接触抑制后,贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞增殖。这样即为传代培养。 分类:10代内的细胞;10-50代;50代以后。 有关概念: 1、选用组织时,一般用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做培养材料,而不用老龄动物的,这是为什么? 因为幼龄组织或器官上的细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛,容易培养。 老龄动物的细胞则相反。 学习活动二:寻根问底,加深巩固 2、胰蛋白酶处理组织时要注意什么问题? 能够用胃蛋白酶代替吗? 控制好消化时间,太长会消化细胞膜上的蛋白质 不能,因为两者的最适PH不同,而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近. 学习活动二:寻根问底,加深巩固 3、动物细胞培养能否最终培养成新个体? 不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体 学习活动二:寻根问底,加深巩固 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 胰蛋白酶 剪碎 单个细胞 加培养液 制成 细胞悬浮液 原代培养 细胞增殖 部分细胞无限传代 去掉组织间蛋白 动物细胞培养不能 最终培养成生物体 传代培养 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的知识,认为体外培养动物细胞应该模拟内环境的哪些条件呢? 问题探讨: 动物细胞培养条件: 1、无菌、无毒的环境 (添加一定量的抗生素,定期更换培养液) 2、营养 (葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。) 3、温度和PH 36.5+(-)0.5度, 7.2-7.4 4、气体环境: O2和CO2(95%空气和5% CO2 ) 保证细胞顺利的生长增殖 * * 胰蛋白酶水解蛋白质 * 胃蛋白酶最适PH约为2.在PH为7的环境下已经失去活性 * 50代细胞以后,细胞发生了癌变
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