菊花的组织培养技术选修一.ppt

菊花的组织培养 作者：陈丽 三 实验操作 三 实验操作 三 实验操作 三 实验操作 三 实验操作 三 实验操作 三 实验操作 三 实验操作 三 实验操作 * * * 专题三 课题一 学习目标 1、说明植物组织培养的原理 2、概述影响植物组织培养的主要因素 3、以菊花为例，说明植物组织培养的基本过程及无菌技术 学习重点与难点 植物组织培养过程中使用的无菌技术。 自主探究 1.植物组织培养应用的理论基础是什么? 2. 植物组织培养的基本过程和必要条件是什么? 3. 基本概念： 外植体 脱分化 再分化 愈伤组织 4. 影响植物组织培养的因素有哪些?如何影响？ 5. 菊花组织培养的实验步骤。 6 . 总结实验过程的无菌操作。 　　离体培养植物的器官、组织，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，使其发育成完整植株的技术。 1、什么是植物组织培养？ 2、植物组织培养的原理是什么？ 植物细胞具有全能性. 全能性的比较: 受精卵 生殖细胞 体细胞 植物体细胞 动物体细胞 练习:1958年，美国科学家斯图尔德将分离得到的成熟胡萝卜根的韧皮部细胞进行培养，由单个细胞发育成完整的新植株，请分析： 1 开花的胡萝卜植株 2 胡萝卜的切片 3 从根的切片分离的细胞 4 由单个细胞分裂后形成的细胞团 5 胚状体 6 试管植物 (1)这种生殖方式属于_________　，这种新技术是__________　。 (2)分离出来的胡萝卜根细胞成为细胞团是通过_____分裂方式来完成的。 (3)本实验说明了植物细胞具有______性 。 无性生殖 组织培养 有丝 全能 一 植物组织培养的过程 离体的植物器官、组织 或细胞(外植体） 脱分化（又叫去分化） 愈伤组织 再分化 根或芽等器官 植物体 脱分化：让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。 再分化：脱分化的细胞，在一定的条件下，又重新分化成各种特异性的组织细胞的过程。 愈伤组织：细胞排列疏松、无规则、高度液泡化的无定形的薄壁细胞。 二 影响植物组织培养的因素 营养：矿质元素：大量元素，微量元素 植物激素：细胞分裂素，生长素 环境条件：适宜光照、温度、 PH 外因 内因： 植物种类，同一种植物材料的年龄、保存时间的长短 有机物 ：蔗糖、氨基酸等 （一）制备MS培养基 （二）外植体消毒 （三）接种 （四）培养 （五）移栽 （六）栽培 菊花的组织培养 实验操作流程： （1）制备MS固体培养基 实验室一般使用_____℃保存的配制好的培养基母液来制备 ①配制各种母液 配制母液时，大量元素浓缩__________ ，微量元素浓缩__________ ，常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照__________的质量浓度单独配制母液。 用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。 1mg/ml 4 10倍 100倍 ②配制培养基。 （1）.制备MS固体培养基 实验室一般使用_____℃保存的配制好的培养基母液来制备 4 植物激素 在菊花组织培养中，可以不添加_________________ ，原因是菊花茎段组织培养___________________ 。 比较容易 配制培养液 调PH 培养基的分装 ③灭菌 将分装好的培养基连同其他器械一起进行 _________________。 （1）.制备MS固体培养基 实验室一般使用_____℃保存的配制好的培养基母液来制备 4 高压蒸汽灭菌 1. 同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ 　　微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 思 考 植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等，都会影响实验结果 2、不同植物激素使用顺序和使用量 ①按照不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的实验结果。 使用顺序 实验结果 先使用生长素，后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂，但细胞不分化 先使用细胞分裂素，后使用生长素 细胞既分裂又分化 同时使用 分化率提高 ②当同时使用这两类激素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。 生长素用量比细胞分裂素用量 植物细胞的发育方向 比值高时 有利于根的分化、抑制芽的形成 比值低时 有利于芽的分化、抑制根的形成 比值适中时 促进愈伤组织的生长 （2）外植体消