菊花的组织培养(市公开课).ppt

学习目标 掌握植物组织培养相关理论知识。 熟悉植物组织培养的基本过程。 理解细胞分化概念及脱分化，再分化。 课题重点与难点 课题重点：植物组织培养的基本过程。 课题难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术，细胞分化，脱分化，再分化。 活动一： 1.什么是细胞分化？原因和结果？ 2.什么是脱分化、再分化？ 3.愈伤组织是怎样形成的？有什么特点？ 4.组织培养的过程？以及组织培养的理论基础？ 活动一： 什么是细胞分化？原因和结果？ 什么是脱分化、再分化？ 愈伤组织是怎样形成的？有什么特点？ 组织培养的过程？以及组织培养的理论基础？ 脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官。 * 课题1 菊花的组织培养 活动二： 1. 影响组织培养的因素？ 2.菊花组织培养应注意的问题？ 活动三：用自己的话把菊花组织培养的操作流程给描述出来?（提示：怎样配制MS培养基?外植体消毒应如何进行?接种、培养、移栽时应注意什么问题? ） 基础知识----相关概念 细胞分化： 在个体发育中，相同细胞的后代在形态、 结构、生理功能上发生稳定性差异的过程 基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果 形成各种组织器官 结果： 原因： 2.脱分化： 由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，又叫去分化。 概念： 3.再分化： 愈伤组织是外植体通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。 4.愈伤组织 5.外植体：由活体植物体上提取下来的，接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等。 6.植物组织培养的基本过程 离体条件下利用人工培养条件在无菌情况下培养、生长、发育再生出完整植株的过程。 7.植物组织培养的理论基础： 细胞全能性：具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的能力，即每个生物细胞都具有全能性。 细胞全能性表达条件： 离体、一定的营养物质、激素和其他 外界条件 活动二： 影响组织培养的因素？ 菊花组织培养应注意的问题？ 影响植物组织培养的因素： 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 菊花的组织培养：一般选择未开化植株的茎上部新萌生的侧枝 （1）、外植体的选取 （2）、培养基的配制(MS培养基) 大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等 讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ 答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 ①常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素 生长素类： 2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA） 细胞分裂素类： 激动素（KT）、6－苄基嘌呤（ 6－BA）、玉米素（ZT） 赤霉素类： 赤霉酸（GA3） （3）植物激素的影响 ②生长素和细胞分裂素作用 植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势 使用顺序 实验结果 先使用生长素，后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂，但不利分化 先使用细胞分裂素后使用生长素 细胞既分裂也分化 同时使用 分化频率高 生长素 细胞分裂素： 有利于根的分化 生长素 细胞分裂素： 有利于芽的分化，抑制根的分化 生长素 细胞分裂素： ＝ 促进愈伤组织生长 ③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例对植物细胞发育方向的影响 （4）、消毒 在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境 （5）、pH、温度、光照 菊花： pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光照12h 用自己的话把菊花组织培养的操作流程给描述出来?（提示：怎样配制MS培养基?外植体消毒应如何进行?接种、培养、移栽时应注意什么问题? ） 活动三： 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培 养 栽 培 实验操作 移