第十五章甾体.ppt.ppt

发现与发展 1、甾体激素是在研究哺乳动物内分泌系统时发现的内源性物质。 2、1932年至1939年间，从腺体中获得雌酮(Estrone，1932年)、雌二醇(Estradiol,1932年)、睾酮(Testosterone，1935年)及皮质酮(Corticosterone,1939年)等的纯品结晶，之后又阐明了其化学结构，从此开创了甾体化学和甾体药物化学的新领域。随后，又有许多重大的成就。 3、发明用薯蓣皂甙(Diosgenin)为原料进行半合成生产甾体药物，使生产规模扩大，成本降低。 4、发现肾上腺皮质激素治疗风湿性关节炎及其在免疫调节上的重要价值，使甾体药物成为医院中不可缺少的药物。 5、甾体口服避孕药的研究成功，使人类生育控制达到了新水平。 （一）肾上腺皮质激素 肾上腺皮质激素主要结构特征 （1）A环?4-3-酮结构，有紫外吸收 （2）D环的C17上?-醇酮基，有还原性。 （3）10位、13位?-甲基， 11位羟基、羰基等受立体效应影响， 无利用价值； 人工合成品：1、2位间有双键，6?，9?位引入卤素，16?或16?位引入甲基，16?位引入羟基。 （二）雄性激素 雄性激素及蛋白同化激素 结构特点： 雄性激素母核含有19个C， 蛋白同化激素的C10位无角甲基，母核含有18个C， A环的?4-3-酮，有紫外吸收； C17位b羟基或由它们形成的酯 人工合成孕激素分类： 孕酮类：醋酸甲地孕酮 睾酮类：炔诺酮、左炔诺孕酮 孕激素结构特点 A环的?4-3-酮，有紫外吸收； C17位有甲酮基 或乙炔基 多数在C17位上有羟基或被酯化。 （四）雌激素 A环为苯环，3位上有酚羟基或成酯 D环17位：b羟基或成酯、有些药物有?-乙炔基 二、鉴别试验 (一)物理常数的测定 1熔点 2比旋度 3吸收系数 铁-酚试剂法 ①?? 铁酚试剂的组成 硫酸亚铁铵、浓硫酸 、过氧化氢、 苯酚 ②?? 浓硫酸和过氧化氢的作用 浓硫酸和过氧化氢将2价铁氧化成3价铁。 ③三价铁的作用 ⅰ．能够加快黄色生成的速度 ⅱ．能促进黄色向红色的转变 ⅲ．能增加红色的稳定性 ④?? 苯酚的作用 ⅰ．可消除反应产生的荧光 ⅱ．能够促进红色的生成 比色法与紫外分光光度法的比较 比色法 紫外法 药物需经处理显色 不需要 可见光 可见－紫外区 比色计、分光光度计 紫外分光光度计 单色光纯度不够，A不恒定 单色光足够，A恒定 对照品比较法（显色影响因素多） 吸收系数法，对照品比较法 （四）非水溶液滴定法 米非司酮（二甲氨基）具有弱碱性，ChP采用非水溶液滴定法测定其含量 冰醋酸 结晶紫 高氯酸 空白试验校正 反应摩尔比1：1 六.生物样品中甾体激素分析 生物体中内源甾体激素及其代谢产物干扰测定，且浓度低，所以首选GC，HPLC，GC-MS和HPLC-MS （3）水分、O2 、光线与温度的影响 含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓ 具塞玻璃容器中反应→ O2与光线无影响 t℃ ↑ → ν↑ 反应专属性 （4） C3= O ＞ C17= O 、 C20= O C11= O 不反应 反应专属性 C3－酮基 1. 原理 雌激素 Kober反应比色法 Kober反应缺点： （1）条件较难控制，易出双色→黄+红 （2）重现性较差： ① 呈色强度和稳定性受试剂浓度、组成、反应时间和温度的影响。 ② 甾体激素提取物中其他物质及制剂中稳定剂、赋形剂、溶剂对测定有干扰。 515 第二步反应 465 450 500 550nm A Kober 反应吸收光谱 第一步反应 采用本法测定炔雌醇片及复方炔诺酮片、复方炔诺孕酮滴丸、复方左炔诺孕酮片中的炔雌醇的含量 中国药典 （2）HPLC法（主成分自身对照法） 判定方法： 规定杂质峰数目 规定杂质峰面积 取本品适量，精密称定，以无水乙醇为溶剂，配制成每1ml含2mg的溶液（1）与每1ml含0.04mg的溶液（2），用含量测定项下的方法和溶液(0.16mg/ml)，取10μl注入液相色谱仪，调整仪器灵敏度，使主成分峰高度达记录仪的满量程。再分别取溶液（1） 醋酸甲地孕酮 检查 其他甾体 和溶液（2）各10μl，进样。记录至主成分峰保留时间的2倍。溶液（1）显示的杂质峰数不得超